芍藥屬部分種和栽培品種親緣關(guān)系RAPD分析.pdf

1、芍藥屬是芍藥科的唯一屬，含牡丹組、北美芍藥組和芍藥組。中國是芍藥科植物的起源、進化及多樣性的中心，特別是其中的牡丹組為我國特有。基于RAPD技術(shù)，開展芍藥屬部分野生種和栽培品種的親緣關(guān)系研究有助于探討芍藥屬種質(zhì)的分類地位、起源，并可為新品種的選育提供分子依據(jù)。
　　本研究首先應(yīng)用單因素法對影響芍藥屬種質(zhì)RAPD單引物PCR擴增體系的5個因素進行了優(yōu)化，建立了芍藥屬種質(zhì)RAPD單引物PCR擴增體系，其中Mg2+濃度為1.75mmol

2、/L，dNTPs濃度為0.2mmol/L，Taq酶為1.5U/20μL，單引物濃度均為0.5μmol/L，DNA量為18ng，補加雙蒸水至20μL；另外，本研究還建立了芍藥屬種質(zhì)RAPD雙引物PCR擴增體系，其中Mg2+濃度1.5mmol/L，dNTPs濃度0.3 mmol/L，Taq酶1.5U，雙引物濃度均為0.4μmol/L， DNA量為12ng，補加雙蒸水至20μL。優(yōu)化的單引物或雙引物RAPD擴增體系的穩(wěn)定性較好，可以應(yīng)用于芍藥

3、屬種質(zhì)RAPD親緣關(guān)系的分析。
　　應(yīng)用建立的單引物和雙引物 RAPD擴增體系，共篩選出10個單引物和兩個雙引物組合用于芍藥屬種質(zhì)的RAPD親緣關(guān)系分析。芍藥屬部分野生種和栽培品種46份種質(zhì)共擴增出108條RAPD譜帶，牡丹野生種擴增出81條譜帶，其中75條譜帶具多態(tài)性位點，其多態(tài)率為92.5％；牡丹栽培品種擴增出99條譜帶，其中76條具多態(tài)性位點，其多態(tài)率為76.7%；芍藥栽培品種擴增出79條譜帶，其中55條具多態(tài)性位點，其多態(tài)

4、率為69.6%。
　　應(yīng)用NTSYS-pc2.10統(tǒng)計分析軟件，采用UPGMA法對46個芍藥屬種質(zhì)進行了遺傳分析，主要結(jié)論如下：1、在遺傳距離0.9處，11個芍藥栽培品種聚類為一組，而35份牡丹種質(zhì)（6個野生種、17個中原牡丹栽培品種、12個國外牡丹栽培品種）聚類為一組；2、6個牡丹野生種的遺傳距離聚類分析結(jié)果表明革質(zhì)花盤亞組的‘四川牡丹’、‘卵葉牡丹’和‘紫斑牡丹’聚類為一組，而肉質(zhì)花盤亞組的‘狹葉牡丹’、‘黃牡丹’和‘滇牡丹’

5、聚類為另一組；3、野生牡丹種與牡丹栽培品種的親緣關(guān)系由遠到近依次排列為：‘滇牡丹’、‘黃牡丹’、‘狹葉牡丹’、‘四川牡丹’、‘紫斑牡丹’和‘卵葉牡丹’；4、中原牡丹栽培品種與國外牡丹栽培品種遺傳距離的聚類分析結(jié)果表明地緣相近的牡丹栽培品種具較高的遺傳相似性；5、牡丹、芍藥組間雜種‘伊藤雜種’表現(xiàn)出與牡丹更近的親緣關(guān)系，與‘金閣’的親緣關(guān)系最近；6、芍藥品種‘向陽奇花’與其他10個芍藥栽培品種的親緣關(guān)系較遠；7、花色相近的芍藥栽培品種其親