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1、雜交育種是牡丹育種的主要方式,但遠(yuǎn)緣雜交敗育和育種周期長(zhǎng)是其主要瓶頸??朔h(yuǎn)緣雜交不親和性同時(shí),利用子房、胚珠和胚培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行胚挽救對(duì)輔助牡丹育種有重要意義。本研究利用田間調(diào)查、遠(yuǎn)緣雜交、顯微觀察與離體培養(yǎng)等方法對(duì)黃牡丹Paeonia lutea遠(yuǎn)緣雜交與敗育機(jī)理以及子房、胚珠與胚培養(yǎng)進(jìn)行研究,獲得組內(nèi)雜種苗,并確定了主要組合的敗育原因,建立了穩(wěn)定的胚培養(yǎng)體系。主要研究結(jié)果如下:
1.受精前障礙是多數(shù)遠(yuǎn)緣雜交組合結(jié)實(shí)率低的主要
2、原因。父本黃牡丹的花粉活力與結(jié)實(shí)率都較高,且在減數(shù)分裂過(guò)程中沒有出現(xiàn)異常現(xiàn)象,是良好的雜交父本;母本雌蕊正常,不存在單性結(jié)實(shí)現(xiàn)象。授粉后黃牡丹花粉黏附于各個(gè)柱頭的數(shù)量均較高,但各個(gè)柱頭及其附近的柱頭乳突細(xì)胞內(nèi)均產(chǎn)生胼胝質(zhì);大部分花粉管生長(zhǎng)遲緩,且有扭曲、腫脹、結(jié)合、分枝等現(xiàn)象發(fā)生;少數(shù)花粉管能穿過(guò)柱頭進(jìn)入花柱,但常有胼胝質(zhì)沉積其中。
雜交組合是影響結(jié)實(shí)率的關(guān)鍵。‘鳳丹白’、‘花蝴蝶’、‘黑花魁’、‘丹頂鶴’、‘百花叢笑’、‘海
3、黃’、‘群英’作母本與黃牡丹雜交均具有較高的結(jié)實(shí)率。相對(duì)牡丹品種來(lái)說(shuō),芍藥品種‘金鳳’、‘手扶銀須’、‘奇花露霜’’作母本與黃牡丹雜交的結(jié)實(shí)率較低,‘美菊’作母本與黃牡丹雜交沒有結(jié)實(shí)。
本試驗(yàn)共設(shè)制14種組合,雜交348朵花,收獲299粒種子,培育24株幼苗,表明黃牡丹野生種與牡丹栽培品種雜交的這項(xiàng)育種工作具有廣泛的發(fā)展前景。
2.胚培養(yǎng)是克服受精后雜種胚敗育的有效手段。子房、胚珠和成熟胚離體培養(yǎng)的初步研究結(jié)果表明:
4、以‘丹頂鶴’作母本與黃牡丹雜交獲得子房產(chǎn)生較多愈傷組織而胚珠接種于培養(yǎng)基上褐化、受污染嚴(yán)重。胚萌發(fā)培養(yǎng)基為MS+0.1mg·L-1 NAA+1.0mg·L-16-BA,增殖培養(yǎng)基為MS+2.0mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA,生根培養(yǎng)基為MS+0.2mg·L-1IAA,生根率達(dá)到80%,移栽馴化后的小苗成活率達(dá)75%。
本研究實(shí)現(xiàn)了野生種黃牡丹與牡丹栽培品種的遠(yuǎn)緣雜交育種,并為離體胚培養(yǎng)技術(shù)在黃牡丹的遠(yuǎn)緣雜交育種
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