野生稻、栽培稻及其遠(yuǎn)緣雜交后代的分子遺傳差異研究.pdf

1、本文應(yīng)用序列多態(tài)性和長(zhǎng)度多態(tài)性標(biāo)記分析了野生稻(包括2個(gè)AA型野生稻和12個(gè)非AA型野生稻)和亞洲栽培稻(O.sativa L，以下簡(jiǎn)稱栽培稻)葉綠體基因組的遺傳多態(tài)性，應(yīng)用長(zhǎng)度多態(tài)性標(biāo)記(ISSR和SSR)分析了野生稻、栽培稻以及水稻種間遠(yuǎn)緣雜交后代核基因組的遺傳多態(tài)性，進(jìn)而探討了水稻的遺傳多樣性、種間親緣關(guān)系以及遠(yuǎn)緣雜交(不同基因組型之間雜交)后代的遺傳規(guī)律。 主要結(jié)果如下： 1.葉綠體DNA遺傳多態(tài)性的研究用葉綠體

2、DNA兩個(gè)位點(diǎn)上的長(zhǎng)度多態(tài)性片段標(biāo)記(分別為 ORF100、ORF29-TrnC<'GCA>)對(duì)水稻葉綠體DNA進(jìn)行秈粳特性分析，發(fā)現(xiàn)非AA型野生稻葉綠體DNA基本上都表現(xiàn)粳型特性。對(duì)2個(gè)多變區(qū)域(rps16基因內(nèi)含子、TrnT <'UGU>-TrnL <'UAA>間區(qū))進(jìn)行PCR擴(kuò)增并測(cè)序，發(fā)現(xiàn)水稻種間葉綠體DNA具有豐富的多態(tài)性，利用這2個(gè)片段的多態(tài)性構(gòu)建了反映水稻種間親緣關(guān)系的系統(tǒng)樹，并初步建立了水稻種間葉綠體DNA指紋圖譜。還利

3、用這2個(gè)多變區(qū)域具有秈粳分型標(biāo)記作用的4個(gè)位點(diǎn)對(duì)非AA型野生稻葉綠體DNA的秈粳特性進(jìn)行了進(jìn)一步研究，其中3個(gè)表現(xiàn)粳型特性、1個(gè)表現(xiàn)部分秈型特性，但其與分型標(biāo)記已不完全相同，產(chǎn)生了一定程度的變異。 2.核DNA遺傳多態(tài)性的研究從65對(duì)SSR引物中篩選出泳帶遷移率差異較大的11對(duì)SSR引物用于實(shí)驗(yàn)。這11對(duì)SSR引物共檢測(cè)到104個(gè)多態(tài)性片段，平均每個(gè)基因座有等位基因 9.5個(gè)，材料平均遺傳距離為1.96(0.98～2.94)。從

4、43個(gè)ISSR引物中篩選出帶形清晰、多態(tài)性高的8個(gè)引物用于實(shí)驗(yàn)。這8個(gè)引物從28個(gè)供試材料中擴(kuò)增出多態(tài)性帶166條，平均每個(gè)引物出帶20.8條，材料平均遺傳距離為2.39(1.00～3.79)。兩種標(biāo)記估算的遺傳距離呈顯著正相關(guān)，構(gòu)建的親緣關(guān)系樹十分相似。 在11對(duì)SSR引物檢測(cè)到的104個(gè)多態(tài)性片段中，非AA型野生稻的特異性片段74條，占總片段數(shù)的71.2％。在8個(gè)ISSR引物檢測(cè)到的166條多態(tài)性片段中，非AA型野生稻的特異

5、性片段113條，占總片段數(shù)的68.7％。上述結(jié)果表明，水稻非AA基因組類型的核基因組遺傳多樣性豐富，且具有很多從基因組沒有的基因源，可以為水稻育種提供豐富的種質(zhì)資源。 3.栽培稻×重穎野生稻[O.grrandiglumis(Doell)Prod]種間雜種及回交群體的構(gòu)建與分析本研究通過幼胚拯救技術(shù)構(gòu)建了栽培稻×重穎野生稻的種間雜種及回交后代群體，所得回交后代莖稈粗壯、生物量大，柱頭非常發(fā)達(dá)，部分株系清晨開花(早上6: 30 左右