牡丹芍藥組間遠緣雜交及‘鳳丹’胚培養(yǎng)研究.pdf

1、本文以芍藥品種‘粉玉奴’（Paeonia lactiflora‘Fenyunu’）為母本，牡丹品種‘鳳丹’（Paeonia suffruticosa‘Fengdan’）為父本，進行遠緣雜交。通過對其花粉的貯藏和活力測定以及電鏡掃描，對比雜交親本花粉貯藏過程中花粉活力變化、花粉形態(tài)差異;試驗對母本‘粉玉奴’開花習性和柱頭可授期進行了觀察統(tǒng)計，確定了最佳授粉時期;通過對人工授粉后柱頭和胚胎的跟蹤觀察，探究了遠緣雜交不育的原因。對‘鳳丹’成熟

2、胚培養(yǎng)研究了根長和不同GA3和6-BA對胚離體組織培養(yǎng)的影響。研究結果如下:
　　1.所用父本‘鳳丹’花粉活力在相同的貯藏條件下的不同時期內均高于芍藥母本‘粉玉奴’，雖然隨著貯藏時間的增加，花粉活力逐漸下降，但是授粉前花粉活力66.03％,符合雜交授粉用花粉標準。電鏡掃描試驗結果表明，親本花粉粒形態(tài)相似，只在表面紋飾上有差異，且父本‘鳳丹’花粉畸形率小于母本‘芍藥’。
　　2.‘粉玉奴’群體花期為4月25日～5月3日，4月2

3、8日進入盛花期;松雷-大蕾-開放的過程約需要1～2d，盛花期約4～5d;盛花期的第二天柱頭開始分泌粘液，通過對柱頭的追蹤觀察，確定第2～6d為柱頭的可授期，開花后第4～5d可授性最強，粘液能夠粘住花粉。
　　3.牡丹與芍藥遠緣雜交主要存在受精前障礙，‘鳳丹’花粉能夠在芍藥柱頭上粘附并萌發(fā)，但是萌發(fā)時間滯后，花粉管的生長受到阻礙，表現出不同形式的畸形，并誘導柱頭產生一系列的胼胝質反應，最終使花粉管難以穿過花柱進入子房完成受精。

4、>　　4.對胚珠的切片觀察未發(fā)現胚囊內有胚生成或胚敗育，未完成雙受精的個體在授粉14d后與正常自然結實的有明顯差別，具體表現為，心皮表面皺縮，色澤暗淡，授粉后早期胚珠就停止增大、皺縮，之后逐漸干癟。試驗最終獲得雜交種子49粒，遠緣雜交結實率為1.41％。
　　5.胚的組織培養(yǎng)試驗表明根長4-5cm時通過添加激素打破上胚軸休眠所需時間最短，但是最終的胚苗褐化和愈傷較為嚴重，平衡各項指標后認為打破上胚軸休眠適宜的根長為3-4cm的胚苗

5、。不同根長胚苗可溶性糖含量差異不顯著，隨著根長度增加，可溶性淀粉含量總體呈下降趨勢，可溶性蛋白含量呈“下降-上升-下降”的趨勢。
　　6.無論是單一添加GA3還是同時添加GA3與6-BA都能打破上胚軸休眠長出真葉，兩者適宜的配比能夠加速上胚軸休眠解除的速度，并提高成苗率。打破上胚軸休眠所需時間最短的激素配比為6-BA0.1 mg·L-1+GA31.0mg·L-1，最優(yōu)的配比為6-BA0.5mg·L-1GA31.0mg·L-1。另外