小麥-偃麥草新種質(zhì)的分子細(xì)胞學(xué)研究.pdf

1、本文采用遠(yuǎn)緣雜交和染色體工程方法將茸毛偃麥草遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到小麥，創(chuàng)制了一個(gè)部分雙二倍體TE-3以及轉(zhuǎn)移了偃麥草抗病性Y176株系材料。綜合利用醇溶蛋白和谷蛋白、RAPD、SCAR(sequencecharacterizedamplifiedregoin)、根尖染色體計(jì)數(shù)觀察、C-分帶和基因組原位雜交(GISH)分析，對這些小偃麥新種質(zhì)進(jìn)行了鑒定，結(jié)果如下： 1.醇溶蛋白和谷蛋白分析表明，TE-3和部分Y176株系導(dǎo)入了源自茸毛偃

2、麥草特異蛋白帶。 2.用80個(gè)RAPD引物(H、M、P和O組)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到3個(gè)(H18，H20，M04)偃麥草特異引物。對其中一個(gè)引物OPM041430擴(kuò)增的特異片段分析，初步表明該片段是偃麥St基因組區(qū)域的特異標(biāo)記，將該特異片段分離回收、克隆、測序，其序列為1423bp(序列登錄號：AY618664)，根據(jù)測序結(jié)果重新設(shè)計(jì)引物一對引物，成功地轉(zhuǎn)化RAPD標(biāo)記為SCAR標(biāo)記，并利用SACR標(biāo)記對我們選育的小偃麥新種質(zhì)進(jìn)行

3、了鑒定。 3.對具有茸毛偃麥草特異蛋白帶和SCAR標(biāo)記的株系的抗條銹病材料Y176-3系進(jìn)行細(xì)胞學(xué)分析，染色體計(jì)數(shù)及花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂表明，Y176-3有44條染色體，有2對隨體，在減數(shù)分裂中期能觀察到22Ⅱ。利用C帶分析，觀察到Y(jié)176-3中具有一對來自偃麥草的端部有強(qiáng)帶的短染色體。 4.進(jìn)一步用小麥的總基因組DNA做封組，擬鵝觀草(Pseudoroegneriaspicata)DNA作探針，對Y176-3系進(jìn)行了原位