拮抗細(xì)菌對姜瘟病的生物防治研究.pdf

1、Y7 8 3 8 8 1分類號融3 重：生1 2 ：! 』一：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文拮抗細(xì)菌對姜瘟病的生物防治研究指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)研究方向劉 銘2 0 0 5 年5 月摘要本研究在四川地區(qū)的生態(tài)條件下，以防治姜瘟病為目的，從姜栽培區(qū)未發(fā)病及發(fā)病較輕的姜塊莖圍土壤中分離并篩選出大量對姜瘟病原菌有拮抗作用的細(xì)菌菌株。通過平板擴(kuò)散法培養(yǎng)檢測，篩選出對姜瘟病菌具有強(qiáng)拮抗作用的菌株，同時研究菌株的分類地位、發(fā)酵條件、土壤中的定殖情況、促生性以及

2、田間防效試驗(yàn)，為姜瘟病的生物防治提供依據(jù)，主要研究結(jié)果如下：2 0 0 3 年6 月在雅安飛仙關(guān)多功鄉(xiāng)1 3 個未發(fā)病或發(fā)病較輕的生姜田塊中分離到2 1 7 個細(xì)菌菌株，通過平板抑菌試驗(yàn)初篩，其中對姜瘟菌有抑制作用的菌株有3 2 株，占菌株總分離數(shù)的1 4 ．7 ％，抑菌圈直徑l c m 以上的有1 9 個，占拮抗菌總數(shù)的5 9 ．4 ％。其中三個( L 】、D 4 、T I o ) 菌株對姜瘟病有強(qiáng)抑菌作用，抑菌圈直徑都在2 ．2 e

3、 m 以上。L l 、D 4 、T l o 菌株除對姜瘟病菌有抑制作用外，也對葡萄孢菌( B o t r y t i sc i n e r e aP e r s ．) ，油菜菌核菌( S c l e r o t i n i a s c l e r o t i o r u m ) 及小麥赤霉菌( G 而6 e 陀f f 口z e a e ) 等多種病原真菌有抑制作用，可見，它們具有一定的廣譜抗真菌作用。對L l 、D 4 、T l o 菌

4、株進(jìn)行形態(tài)特征和生理生化鑒定，確定L l 為蠟狀芽孢桿菌( B a c i l l u sc e r e u s ) 、D 4 和T l 為地衣芽孢桿菌( B a c i l l u s l i c h e n i f o r m i s ) 。L I 、D 4 、T l o 菌株在姜塊莖圍的定殖試驗(yàn)表明：L l 的最終定殖密度在非滅菌土中為1 ．0 3 ×1 0 4 c f u ／g ，在滅菌土中為3 ．8 8 ×

5、1 0 4 c f u ／g ，比D 4 和T 1 0 分別在非滅菌土和滅菌土中的最終定殖密度都高。它們對生姜的生長均有一定的促進(jìn)作用，其中L ．菌株的促生性最為明顯。用不同濃度的菌懸液處理田間自然發(fā)病的生姜田塊，結(jié)果表明：生防菌對姜瘟病均具有防治作用，且在較高濃度下防治效果更好，L I 菌株在濃度為2 ×1 0 S c f u ／m l 時，防效達(dá)到6 0 ．1 ％。選用田間防效較好的L l 菌株用比濁法和活菌數(shù)法測定它的生

6、長曲線，測定結(jié)果基本符合細(xì)菌生長規(guī)律，且兩種方法測出的細(xì)菌對數(shù)生長期的數(shù)據(jù)基本～致。研究不同條件下L l 菌株的生長情況及抑菌活性的大小，單因子試驗(yàn)表明：L ．菌株的最佳培養(yǎng)基是N Y B D 培養(yǎng)基，最佳碳源是葡萄糖，最佳氮源是牛肉浸膏和酵母浸膏：在P H 為7 ，裝液量為2 5 m l ，溫度為3 0 “ C 的條件下可獲得最佳的生長狀態(tài)與最大的抑菌活性。葡萄糖、牛肉浸膏、酵母浸膏、N a C l 濃度四因素的正交試驗(yàn)表明：L l

7、菌株獲得最大抑菌活性的培養(yǎng)基配方為葡萄糖2 5 9 ，牛肉浸膏l(xiāng) o g ，酵母浸膏5 9 , N a C l1 ．2 ％。其影響因素作用大小依次為：酵母浸膏> 葡萄糖> 牛肉浸膏> N a c l 。L I 菌株獲得最大生長量的培養(yǎng)基配方為葡萄糖2 0 9 ，牛肉浸膏1 0 9 ，酵母浸膏3 9 ，N a C I I ．5 ％。其影響因素作用大小依次為：葡萄糖> 酵母浸膏> N a C I > 牛肉