陜西獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病的生物防治初步研究.pdf

1、獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病是一種獼猴桃的毀滅性病害，不僅嚴(yán)重影響獼猴桃植株的產(chǎn)量，而且使果實的品質(zhì)大大降低；在我國還多次造成毀林毀園等嚴(yán)重后果，現(xiàn)已被列入中國森林植物檢疫對象。 本試驗旨在從陜西不同獼猴桃種植區(qū)的健康植株的根際土壤中，分離并篩選出對獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病有較好頡頏作用的生防芽孢桿菌；并對頡頏效果較好的生防菌株進行鑒定和發(fā)酵條件優(yōu)化；最終采用合理有效的方法應(yīng)用于田間病害的防治。 (1)為了進一步明確陜西獼猴桃細(xì)菌性潰瘍

2、病的病原，從5個獼猴桃種植園采集的病斑組織中分離獲得1種致病菌，依照柯赫氏法則、相關(guān)培養(yǎng)特征和生理生化試驗進行病原鑒定，確定引起陜西獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病的病原菌是丁香假單脆桿菌獼猴桃致病變種(Pseudomonassyringaepv.Actinidiae)。 (2)本試驗從5個獼猴桃種植園采集的25份土壤樣品中，采用在80℃處理10min的方法，共分離獲得115株芽孢桿菌。 (3)本試驗對所分離到的115株芽孢桿菌，采用

3、發(fā)酵濾液的平板頡頏、單胞分離和盆栽防效試驗進行抑菌活性篩選，得到一株對獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病有較強抑菌作用的生防菌株B56-3。 (4)根據(jù)B56-3菌株的大小形態(tài)、平板培養(yǎng)特征及生理生化特性試驗，并參考相關(guān)文獻，初步判定其為芽孢桿菌屬的枯草芽孢(Bacillussubtilis)。 (5)采用單因素分析和復(fù)合設(shè)計(正交設(shè)計)的方法對B56-3菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的進行優(yōu)化，獲得了最佳的培養(yǎng)基組成和發(fā)酵條件。培養(yǎng)基的組

4、成為：葡萄糖1％蔗糖1％玉米粉3％黃豆餅粉2％酵母粉0.2％ZnSO4·7H2O0.06％，K2HPO4·3H2O0.05％；最佳的發(fā)酵條件為發(fā)酵溫度35℃，發(fā)酵液初始pH值為7.0，控制搖床轉(zhuǎn)速150r/min，發(fā)酵時間36h。 (6)通過皿內(nèi)生物頡頏活性測定，研究了B56-3菌株的發(fā)酵濾液的抑菌譜。結(jié)果表明，B56-3菌株的發(fā)酵濾液對棉花枯萎等5種病原真菌和大腸桿菌等2種供試細(xì)菌有較好的抑制效果。 (7)通過獼猴桃田

5、間藥效試驗研究，對B56-3菌株的發(fā)酵濾液田間施藥濃度和施藥方法進行研究，結(jié)果表明發(fā)酵濾液在稀釋100倍時，采用噴霧與刮除病斑涂抹相結(jié)合的方法，防治效果為86.5％。 (8)對B56-3菌株的發(fā)酵濾液的抑菌作用機理進行了初步探索，結(jié)果表明B56-3菌株的發(fā)酵濾液不僅抑制獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病菌的生長繁殖，而且還大大降低了該病原菌的致病性；另外還發(fā)現(xiàn)，B56-3菌株的發(fā)酵濾液還可以提高獼猴桃植株體內(nèi)的保護酶(SOD和POD)活性。