大鱗副泥鰍仔稚魚消化系統(tǒng)發(fā)育及腸呼吸結構特征研究.pdf

1、大鱗副泥鰍（Paramisgurnus dabryanus）隸屬于鯉形目（Cypriniformes），花鰍科（Cobitidae），副泥鰍屬（Paramisgurnus），主要分布于長江中下游。其肉質鮮美，是一種營底棲生活的小型經(jīng)濟魚類。近年來，隨著大鱗副泥鰍的需求量逐年上升，人工養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴大，對大鱗副泥鰍魚苗的需求量也逐漸增加。但是，大鱗副泥鰍在苗種階段的高死亡率，成為了其規(guī)模化人工養(yǎng)殖的巨大阻礙。因此，通過對大鱗副泥鰍早期消化

2、系統(tǒng)的組織學、組織化學以及消化酶變化進行研究，了解大鱗副泥鰍消化系統(tǒng)的形成和發(fā)育過程，并對其腸呼吸組織結構特點進行初步探討，豐富大鱗副泥鰍早期生活史基礎資料，同時也為規(guī)?；绶N培育提供理論支持。主要研究結果如下：
　　利用組織學和組織化學的方法，對大鱗副泥鰍消化系統(tǒng)胚后發(fā)育進行顯微觀察和研究。結果顯示：大鱗副泥鰍初孵仔魚口咽腔封閉，消化道為一條封閉的柱形直管。3日齡仔魚卵黃囊體積明顯減小，腸道前端開始膨大。4日齡時，仔魚開口攝食，

3、口咽腔可見味蕾和杯狀細胞，消化道迅速發(fā)育，食道結構開始分化為前后兩部；5日齡，卵黃囊基本耗盡，肝臟呈網(wǎng)狀結構，肝血竇出現(xiàn)；7日齡，仔魚的口咽腔味蕾和粘液細胞大量增加，肝臟出現(xiàn)脂肪空泡；15日齡后，食道前后段結構差異顯著，后段呈“I”形狀。20日齡，食道粘液細胞豐富，腸道，肝臟和胰臟發(fā)育逐漸完成。50日齡幼魚前腸粘膜褶皺結構復雜，粘液細胞豐富；中腸到后腸毛細血管逐漸豐富，管壁也逐漸變薄，分化為明顯的消化區(qū)與呼吸區(qū)。20日齡后大鱗副泥鰍消化

4、系統(tǒng)逐漸發(fā)育完善；10-20日齡為腸道呼吸功能形成期，腸道呼吸功能的形成與其生存在靜水低氧環(huán)境有關。
　　利用組織學切片及阿利新藍-過碘酸雪夫（AB-PAS）組化染色技術對仔稚魚消化道各段粘液細胞的發(fā)育與分布進行顯微觀察和研究。大鱗副泥鰍粘液細胞分為I、II、III和 IV4種類型。消化道粘液細胞最早出現(xiàn)在4日齡仔魚的口咽腔和食道。10至15日齡，口咽腔和食道粘液細胞數(shù)量快速增長，15至20日齡腸道各型粘液細胞數(shù)量顯著增長，20日

5、齡后消化道粘液細胞分布廣泛。隨著仔稚魚發(fā)育，消化道各部粘液細胞主要以III和 IV型細胞為主。根據(jù)大鱗副泥鰍仔稚魚消化道粘液細胞的發(fā)育特點，5至10日齡和15至20日齡為其消化道功能發(fā)育的兩個敏感時期，20日齡后消化道功能逐漸發(fā)育完善。
　　測定了大鱗副泥鰍仔稚魚期間的特定生長率、可溶性蛋白含量和幾種消化酶活性變化。1日齡仔魚體內能檢測到胰蛋白酶，脂肪酶，淀粉酶以及堿性磷酸酶的活性。仔魚可溶性蛋白含量先下降，在3日齡達到最小值（0

6、.158?0.01） mg/mL，隨后逐漸上升。胰蛋白酶，脂肪酶，淀粉酶，堿性磷酸酶的全活力與比活力變化模式不同。消化酶的全活力均隨著仔魚生長發(fā)育而增加。仔魚在7日齡胰蛋白酶的比活力達到峰值（78.97?8.09）U/mg protein，之后顯著下降，15日齡之后顯著性上升，25日齡之后趨于穩(wěn)定。脂肪酶的比活力在5日齡和20日齡有兩個明顯的峰值分別為（0.322?0.02）U/mg protein，（0.835?0.13）U/mg p

7、rotein。淀粉酶比活力在5日齡到達峰值（2.65?0.0）U/mg protein，20日齡后緩慢下降趨于穩(wěn)定。堿性磷酸酶比活力在2至5日齡顯著上升，之后逐漸下降，在15至20日齡比活力有一定上升，25日齡后逐漸趨于穩(wěn)定。
　　利用光鏡和電鏡對大鱗副泥鰍成魚腸道的組織形態(tài)和超微結構進行觀察。其腸道可以分為前、中、后3段，腸壁由內向外包括：粘膜層、粘膜下層、肌肉層和漿膜層。腸道各段的粘膜褶皺高度、粘膜層以及肌層厚度，后腸顯著低于

8、前中腸。而較于前中腸，后腸粘膜上皮有大量的毛細血管，這些毛細血管網(wǎng)與腸腔之間的阻隔距離為（1.95±0.34μm）。掃描電鏡對腸道粘膜表面觀察，后腸無明顯褶皺，粘膜表面柱狀上皮細胞形狀不規(guī)則，輪廓不明顯，而前中腸表面形成形態(tài)復雜的褶皺，并含有大量分泌細胞。粘膜上皮超微察發(fā)現(xiàn)，前腸的明顯的柱狀上皮細胞間連接復合體發(fā)達，分布豐富的杯狀細胞，胞內含有大量的線粒體和吞飲小泡。與此不同，后腸粘膜上皮細胞上皮細胞為特化的扁平上皮細胞，且與哺乳動物的

9、肺泡 I和 II型肺泡細胞超微結構相似，內含有豐富的板層小體。其氣血擴散距離主要由3部分組成：超薄的上皮細胞延伸的胞質層（1.47±0.23μm）；內皮細胞胞質層（0.21±0.03μm）以及兩者之間的基底層（0.27±0.05μm）組成。大鱗副泥鰍腸道兼具消化和呼吸兩大功能，前腸為行使消化和吸收功能場所，后腸為進行氣體交換輔助呼吸的場所，中腸結構介于前后腸之間，是消化與呼吸重疊的區(qū)域。
　　研究結果表明，大鱗副泥鰍仔稚魚4日齡開