復合微生物肥料有效菌株的篩選及代表菌株的分子標記.pdf

1、過量的施用化學肥料,對維持生態(tài)平衡和保持環(huán)境不利,微生物肥料具有長效、無毒、無污染、節(jié)約能源、成本低等特點,可彌補化學肥料的缺點和不足.開發(fā)和利用微生物肥料的一個關鍵問題是繼續(xù)尋找具有高效固氮、解磷、解鉀等為作物提供大量或微量元素或對作物具有促生功能的菌株.該實驗以解磷、解鉀和自生固氮細菌為研究目標,從華中農業(yè)大學校園內的土壤樣品中分離和篩選到解磷細菌9株、解鉀細菌5株和自生固氮細菌4株,將初篩得到的解磷細菌用只含有難溶磷礦粉的基本培養(yǎng)

2、基搖瓶培養(yǎng),然后用鉬銻抗比色法測速效磷含量,結果顯示供試的解磷菌株中菌株PJ07和PJ06的可溶性磷濃度分別達到4.7mg/kg和3.7mg/kg,比對照(2.4mg/kg)增加95.8﹪和54.1﹪,大豆盆栽結果顯示,接種菌株PJ07的處理比不接種的對照生物量增加43.7﹪和40.2﹪,經統(tǒng)計學分析差異達到顯著水平(P<0.05).將初篩得到的解鉀細菌接種到只含有鉀長石礦粉的基本培養(yǎng)基搖瓶培養(yǎng),用原子吸收法測速效鉀含量,結果顯示供試的

3、5個菌株中速效鉀濃度分別為55.9mg/kg、45.6mg/kg、43.3mg/kg、42mg/kg、38.8mg/kg,最低的比對照(21.4mg/kg)多34.6﹪,最高的為HZ03,達到55.9mg/kg,比對照多161﹪,大豆盆栽結果顯示,接種HZ03的處理比不接種的對照生物量增加32﹪,經統(tǒng)計分析差異也達到顯著水平(P<0.05).將平板初篩得到的自生固氮菌株用氣相色譜法測固氮酶活性,得到兩個有較高固氮酶活的菌株NY03和NY

4、02,其酶活分別達到0.43和0.39μmol C<,2>H<,4>(mL)×反應時間(h).將上述各菌株經過微生物生態(tài)學和生理生化鑒定.結果為菌株PJ07屬于假單胞菌屬(Pseudomonas);菌株P01為巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium);菌株HZ03為膠質芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus);菌株NY03為圓褐固氮菌(Azotobacter chrococcum).實驗以這4個菌株為供試菌

5、株,研究了它們的生長曲線、最佳碳源、最佳氮源、最佳碳氮比、最適初始pH、液體發(fā)酵最佳接種量、以及固體發(fā)酵生長情況和堆肥試驗等常規(guī)發(fā)酵特征,以期在生產中具有指導作用.在上述實驗結果的基礎上,將各菌株經斜面培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、固體發(fā)酵制成復合菌劑,經2種不同的方法應用到盆栽中去,其一接種到堆肥基質再施用到土壤,種植油菜;其二直接接種到土壤,種植番茄和玉米;記載植株總生物量.結果顯示,油菜盆比對照增加64﹪,番茄盆栽比對照增加82﹪,玉米盆栽比對