高粱抗高粱蚜遺傳分析及SSR標記研究.pdf

1、高粱蚜是高粱上的一種重要的害蟲,每年對全球的高粱產(chǎn)量和品質(zhì)造成嚴重損失.抗蚜品種是防止高粱蚜的最經(jīng)濟、安全、有效的方法.近年來,分子標記技術(shù)的發(fā)展為加快作物育種進程提供了強有力的武器.但應用于高粱上的分子標記研究起步較晚,從而影響了高粱蚜抗性育種的進程.該研究利用河農(nóng)16×千三的雜交組合,對高梁蚜抗性鑒定方法,抗性遺傳和SSR分子標記等進行了深入的研究.其目的在于:探索高粱蚜抗性遺傳鑒定方法,充分了解高粱蚜抗性遺傳的特點,建立一套適合高

2、梁蚜抗性的SSR體系,找到與高粱蚜抗性基因連鎖的分子標記,為最終掌握高粱蚜抗性遺傳規(guī)律,克隆高粱蚜抗性基因奠定基礎(chǔ).主要研究結(jié)果如下:1.河農(nóng)16×千三雜交組合的親本、F<,1>、F<,2>田間鑒定及遺傳分析,結(jié)果表明:河農(nóng)16具有對高粱蚜免疫的抗性,千三為高感高粱蚜品種,所得F<,1>為高抗,F<,2>抗、感分離比例符合3:1,因此河農(nóng)16的抗性是由一對基因控制的,抗蟲性為顯性,F<,1>表現(xiàn)完全顯性.2.選取河農(nóng)16作為材料,采用單

3、因素篩選和完全隨機組合相結(jié)合的方法,建立了一套適合高粱抗高粱蚜的SSR體系.其中TaqDNA聚合酶0.3μL(5u/μL),10×PCR Buffer 2.0μL,引物1.5μL(10 μ mol/L),模板DNA 60 ng.利用該體系進行擴增,所得譜帶清晰、穩(wěn)定、非特異性帶少.3.用99對SSR引物對雜交組合河農(nóng)16×千三的親本、抗感基因池進行擴增,結(jié)果表明:在兩親本之間,有17對引物表現(xiàn)明顯而穩(wěn)定的多態(tài)性,散布于8個連鎖群上,多態(tài)

4、性頻率為17.8％;但在抗感基因池間只有一對差異引物.這說明河農(nóng)16和千三間遺傳背景的差異是比較大的,因此分離群體多樣性越大,越適宜構(gòu)建作圖群體.4.分別用親本間有多態(tài)性的17對SSR引物對河農(nóng)16×千三的F2隱性單株進行擴增,并對擴增結(jié)果進行分析,表明:與高粱蚜感蟲基因相關(guān)的只有1個SSR位點:Xtxp6.采用MAPMAKER軟件,對Xtxp6的所有F2單株的SSR擴增結(jié)果進行分析,初步確定了高粱蚜抗性標記基因與SSR標記位點Xtxp