我國不同地區(qū)辣椒疫霉群體遺傳結(jié)構(gòu)和抗藥性分析.pdf

1、由辣椒疫霉(Phytophthora capsici Leonian)引起的植物疫病是毀滅性的植物病害，嚴重影響著全世界蔬菜等農(nóng)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。辣椒疫霉群體遺傳結(jié)構(gòu)和對殺菌劑的敏感性變化直接影響著病害的發(fā)生與流行。為有效防治植物疫病，本論文對來自全國6大地區(qū)（華東、華北、西南、西北、東北和華南）以及美國（1個）的55個辣椒疫霉菌株進行了遺傳多樣性和對殺菌劑當(dāng)家品種的抗性分析，獲得如下的研究結(jié)果:
　　1、利用直接配對法測定了55

2、個辣椒疫霉菌株的交配型。結(jié)果顯示，我國不同地區(qū)菌株交配型為A1或A2，這兩種交配型在我國各地區(qū)都有分布。除華南地區(qū)只有A2交配型以外，其他地區(qū)A1和A2交配型的比例接近1∶1。
　　2、利用7對SSR引物(Pcap1、Pcap3、Pcap4、Pcap5、Pcap6、Pcap7和Pcap8)分析了辣椒疫霉群體的遺傳多樣性。①首先建立了SSR擴增產(chǎn)物檢測過程中一種基于熒光測序技術(shù)的高通量低成本分析技術(shù)TP-M13-SSR。②基于該技術(shù)

3、，利用這7對SSR引物檢測出21個等位基因，平均每個位點檢測出3個等位基因，每個位點至少可以檢測出2個等位基因。x2卡方檢驗表明在7個SSR位點中，5個位點(Pcap1、Pcap4、Pcap6、Pcap7和Pcap8)的等位基因頻率差異極顯著。7對引物中，Pcap3的基因多樣性(Gene diversity)和多態(tài)性信息含量(Polymorphism Information Content)最高，Pcap8的基因多樣性和多態(tài)性信息含量最

4、低。③共鑒定出辣椒疫霉群體中存在32種SSR基因型，其中檢測出西南地區(qū)菌株具有8種基因型，AB是優(yōu)勢基因型，所占頻率為34％。在華北地區(qū)菌株中檢測出10種基因型，DG是主導(dǎo)基因型，所占的頻率為31％。在華東地區(qū)菌株中共檢測到12種基因型，其中基因型DI的比例最高，為21％。3個基因型(AA、AB和BD)各出現(xiàn)過2次，其余基因型都只出現(xiàn)了一次。④地區(qū)種群中，華東地區(qū)種群的遺傳多樣性最為豐富。美國菌株與中國菌株之間存在較強的遺傳分化。

5、>　　3、利用十字交叉法測定了辣椒疫霉菌株對甲霜靈、烯酰嗎啉和丁吡嗎啉的抗藥性。結(jié)果表明，丁吡嗎啉對辣椒疫霉的抑制效果最好，EC50值為0.2156-4.5993μg/mL,最不敏感菌株的EC50值為最敏感菌株的21.33倍。不同地區(qū)采集的菌株對甲霜靈、烯酰嗎啉和丁吡嗎啉的敏感性存在較大差異。
　　4、采用紫外誘變和藥劑馴化的方式獲得6個丁吡嗎啉抗性菌株，其抗性倍數(shù)在5.5645-73.7288之間。在不含藥的PDA(Potato

6、 Dextrose Agar)平板上轉(zhuǎn)代培養(yǎng)15代后，抗性菌株的抗藥性沒有丟失。抗性菌株的交配型與親本菌株一致，說明抗藥性的產(chǎn)生不會影響交配型。抗性菌株在不含藥PDA培養(yǎng)基上的生長速率明顯低于親本菌株，說明抗藥性的產(chǎn)生影響了菌絲的生長速率。分析這些抗性菌株和12個對照菌株對氟嗎啉和雙炔酰菌胺的敏感性，發(fā)現(xiàn)辣椒疫霉菌株對丁吡嗎啉與對烯酰嗎啉、氟嗎啉和雙炔酰菌胺等其他CAA類的藥劑存在交互抗性。
　　本論文建立并利用TP-M13-SS