禾谷鐮孢菌對戊唑醇抗藥性風險評估及抗藥性機制初探.pdf

1、小麥赤霉病是由禾谷鐮孢菌(Fusarium graminearum Schwade)引起的一種世界范圍內(nèi)最重要的病害,也是國內(nèi)外小麥生產(chǎn)上重要防治對象之一。該病不僅給小麥的產(chǎn)量造成損失,同時還產(chǎn)生以脫氧雪腐鐮刀菌烯醇為主的真菌毒素,對人畜都有較大的危害。目前,生產(chǎn)上仍以化學防治為主。但長期單一地使用同類藥劑,可能引起病原菌對藥劑產(chǎn)生抗藥性,導致藥劑防效降低。戊唑醇是一種高效、廣譜、低毒和內(nèi)吸性強的甾醇脫甲基化抑制劑,其作用方式獨特,對小

2、麥赤霉病有很好的效果,但尚未大面積推廣應用。因此,本試驗進行了禾谷鐮孢菌對戊唑醇的敏感基線及對不同作用機制殺菌劑交互抗藥性、室內(nèi)抗藥性風險評估、抗藥性生物學特性、抗藥性生理學機制等方面的研究。主要研究結果如下:
　　 1.確立禾谷鐮孢菌對戊唑醇的敏感性基線。2009～2010年120株禾谷鐮孢菌來源于河南、山東、河北等地區(qū),采用菌絲生長速率法對該120株病原菌進行了敏感性測定。結果表明:EC50值范圍為0.0072～0.2007

3、μg/mL,最高與最低值相差27.88倍,EC50平均值為(0.1026±0.0454)μg/mL,最小抑制濃度(MIC)大于0.8μg/mL以上。120株禾谷鐮孢菌對戊唑醇的敏感性頻率分布呈連續(xù)性的單峰曲線,因此可視為野生敏感菌株,可把EC50平均值為(0.1026±0.0454)μg/mL作為戊唑醇對禾谷鐮孢菌病菌田間抗藥性監(jiān)測的敏感性基線。
　　 2.采用菌絲生長速率法測定11株禾谷鐮孢菌敏感菌對戊唑醇與5種不同作用機制殺

4、菌劑異菌脲、福美雙、百菌清、苯醚甲環(huán)唑和多菌靈的敏感性以及對戊唑醇與5種不同作用機制殺菌劑交互抗藥性研究。結果表明:戊唑醇和多菌靈對禾谷鐮孢菌菌絲生長具有強烈的抑制活性。戊唑醇與5種不同作用機制殺菌劑的EC50值之間進行線性回歸分析表明戊唑醇與上述5種不同作用機制殺菌劑之間均無交互抗藥性。
　　 3.通過紫外線誘導和藥劑馴化的方法獲得了9株禾谷鐮孢菌對戊唑醇的抗藥性突變體,其抗藥性水平范圍為34.26～186.03,抗藥性突變頻

5、率分別為1.11％和0.91%。按照FAO分級標準,這些抗藥性突變體的抗藥性水平根據(jù)EC50值的大小可劃分為低、中、高3種類型,分別為2.0～20μg/mL(LR)、20.1～100μg/mL(MR)和＞100μg/mL(HR)。在無藥PDA培養(yǎng)基上,將抗藥性突變體菌絲繼代培養(yǎng)17代數(shù)后有5株抗藥性突變體保持高抗藥性水平?？顾幮酝蛔凅w生物學性狀的研究結果表明:與親本菌株相比,抗藥性突變體在菌絲生長速率、菌絲干重、致病力、適合度幾個性狀方

6、面差異不明顯。綜上所述,禾谷鐮孢菌對戊唑醇存在中等或高抗藥性風險。因此,戊唑醇的連續(xù)使用有利于抗藥群體的發(fā)展,為避免和延緩抗藥性的產(chǎn)生,生產(chǎn)上應將其與其他無交互抗藥性的殺菌劑交替使用。
　　 4.比較禾谷鐮孢菌對戊唑醇的抗藥性突變體和親本菌株的生理學指標。結果表明:親本菌株和抗藥性突變體菌絲生長受KC1和葡萄糖影響較大,且KC1和葡萄糖在不同濃度處理后所有菌株之間的滲透壓均存在顯著性差異,故得知KC1和葡萄糖均能為禾谷鐮孢菌提供

7、營養(yǎng)和抑制其滲透。高濃度戊唑醇處理能使抗藥性突變體體內(nèi)滲漏出較多的內(nèi)含物,隨著處理時間的延長和濃度的提高,其內(nèi)含物滲漏增多。因此這些結果可能是禾谷鐮孢菌對戊唑醇產(chǎn)生抗藥性的原因。
　　 5.用菌絲生長速率法測定戊唑醇與百菌清11個復配配比混合物的聯(lián)合毒力。結果表明:1:11混配時,其增效系數(shù)(SR值)最大為84.38。由此可以看出,戊唑醇和百菌清以一定的比例進行二元復配對禾谷鐮孢菌有很好的抑制作用,在田問合適的使用其復配制劑,可