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1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文嗜酸氧化亞鐵硫桿菌硫氧還蛋白系統(tǒng)的表達(dá)純化及定點(diǎn)突變姓名：王億平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物工程指導(dǎo)教師：柳建設(shè)曾嘉20090501碩士學(xué)位論文ABSTRACTThioredoxinsystemconstitutesofthioredoxin(Trx)，thioredoxinreductase(TrxR)，13Nicotinamideadeninedinucleotide2phosphatereducedtetras
2、odiumsalt(NADPH)ThevallcontaindisulfideactivesitesequenceofCysGlyProCysThioredoxinsystemCallstabilizethecellsenvironment，regulatecellgrowthandsignaltransductionprocessestoprotectcellsfromreactiveoxygenspeciesdamagecaused
3、byexternalstimulisuchasvirusinfectionionizingradiation；ItiSalsoareductantinmanycellularreactionssuchasribonucleotidereduction，andplayallimportantroleintheregulationofprotein—proteinexpression，protein—nucleicacidexpressio
4、nItisawidespreadinnaturesystemThioredoxin(Trx)iswidespreadpresenceinanimals，plants，fungiandmicrobes，withamolecularmassof12kDaItisanimportantproteinforregulatingenzymesactivity，playakeyroleinredoxcardersthroughthereversib
5、lethi01disulfideredoxchangeinavarietyofreactions，andplaysseveralkeyrolesinmaintainingtheredoxenvironmentofthecellThegeneofthioredoxinfromAferrooxidansATCC23270wascloned，overexpressedandpurifiedbyonestepaffinitychromatogr
6、aphyWreconstructedthemutantexpressionplasmid(C33A，C33S，C36A，C36S)oftheproteinusingsite—directedmutagenesisTheUvⅥsscanningandactivitytestresultsconfirmedthatresiduesCys33，Cys36ofthioredoxinwereactivesiteresiduesThioredoxi
7、nreductase(TrxR)isaNADPHdependentenzymecontainsFADdomainItisamemberofpyridinenucleotide。disulfideoxidoreductasefamilyTheprimaryfunctionofthioredoxinreductaseistocatalysethereductionofthesmallredoxproteinthioredoxinbyNADP
8、H，andmaintainthereducedstateofT】ⅨThegeneofthioredoxinreductasefromAferrooxidansATCC23270wascloned，expressedandpurifiedbyone—stepaffinitychromatographyThemolecularmassoftherecombinantproteinwas35kDacontainingFADWeconstruc
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