31308.海膽(psammechinusmiliarisl.)受精卵中葡萄糖6磷酸脫氫酶定位及定量方法的建立和應(yīng)用

1、中國(guó)海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文海膽（PsammechinusmiliarisL.）受精卵中葡萄糖6磷酸脫氫酶定位及定量方法的建立和應(yīng)用姓名：王婷婷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：海洋生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳松林AngelaKoehler20090609酶蛋白量的變化。測(cè)量結(jié)果顯示為逐漸下降趨勢(shì)，單因素方差和同類(lèi)子集分析表明，未受精卵細(xì)胞內(nèi)G6PDH含量和受精后卵細(xì)胞內(nèi)G6PDH含量存在顯著差異(pO05)。(3)利用砌v加圖像分析技術(shù)對(duì)葡萄糖6磷酸脫氫酶在

2、受精過(guò)程中的活性進(jìn)行了研究。試驗(yàn)在方法上通過(guò)生物化學(xué)、物理光學(xué)、影像學(xué)的有機(jī)結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了在不破壞細(xì)胞的前提下，對(duì)存活海膽卵細(xì)胞的受精過(guò)程中葡萄糖6磷酸脫氫酶的活性進(jìn)行了實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和定量分析。試驗(yàn)結(jié)果顯示：在受精之前，卵細(xì)胞中的葡萄糖一6磷酸脫氫酶基本不具有活性，經(jīng)過(guò)受精刺激后，葡萄糖6一磷酸脫氫酶的活性被激活，其活性在隨后的受精卵發(fā)育過(guò)程中依然呈現(xiàn)上升趨勢(shì)；活性區(qū)域分析表明，相比較于細(xì)胞質(zhì)區(qū)域，葡萄糖6磷酸脫氫酶在皮質(zhì)區(qū)內(nèi)的活性相對(duì)較高。

3、通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析可以得出結(jié)論，免疫熒光技術(shù)和免疫金銀染色技術(shù)都是敏感的、特異的、可靠的標(biāo)記技術(shù)，都可以在免疫組化研究中被廣泛應(yīng)用；加1，^舊圖像分析和“灰度吸光度”轉(zhuǎn)換方法作為新興的實(shí)時(shí)定量分析技術(shù)，具有廣闊的應(yīng)用范圍和一定的發(fā)展前景。同時(shí)可知，海膽卵細(xì)胞的受精過(guò)程，可以激活細(xì)胞內(nèi)的葡萄糖6磷酸脫氫酶，使它從不溶性的、無(wú)活性狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇艿?。活性狀態(tài)，且其活性會(huì)在隨后的時(shí)間內(nèi)繼續(xù)加強(qiáng)。關(guān)鍵詞：免疫金銀染色；免疫熒光標(biāo)記；脅vfvD圖