轉(zhuǎn)mtlD基因旱稻和水稻的耐鹽性以及遺傳檢測.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究利用基因槍轉(zhuǎn)化技術(shù)將來源于大腸桿菌的mtlD(1-磷酸甘露醇脫氫酶)基因?qū)牒档竞退局?以期通過基因工程手段提高植物的耐鹽性.以旱稻成熟胚、水稻幼胚和成熟胚誘導(dǎo)的胚性愈傷為受體材料,確定旱稻篩選壓力為50mg/L潮霉素B.試驗(yàn)表明,旱稻和水稻愈傷組織的繼代時(shí)間對抗生愈傷的篩選頻率無明顯影響;基因槍轟擊后愈傷組織的恢復(fù)時(shí)間(≤7天)較長時(shí),潮霉素B濃度應(yīng)適當(dāng)提高.水稻幼胚誘導(dǎo)的胚性愈傷的轉(zhuǎn)化效率高于成熟胚.利用mtlD基因M5'引

2、物和M3'引物,對抗性再生植株進(jìn)行PCR檢測證明,目的基因已插入到旱稻和水稻基因組中.T<,1>代轉(zhuǎn)基因植株P(guān)CR擴(kuò)增、Dot blotting、Southern blotting和Northern blotting檢測表明mtlD基因已整合到旱稻和水稻基因組中,并在T<,1>代轉(zhuǎn)基因植株中穩(wěn)定表達(dá).T<,1>代轉(zhuǎn)基因植株在含1﹪NaCl的培養(yǎng)基上正常生長,陰性對照在相同培養(yǎng)基上生根困難,40天內(nèi)全部死亡;土培條件下,T<,1>代轉(zhuǎn)基因

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