SeNHX1轉(zhuǎn)入大豆的遺傳轉(zhuǎn)化及耐鹽性研究.pdf

1、在我國耕地面積有限的情況下，開發(fā)利用鹽堿地，培育耐鹽新品種，是一個(gè)亟待解決的問題。隨著基因工程的發(fā)展，植物抗逆分子機(jī)制研究的不斷深入，利用轉(zhuǎn)基因手段將外源耐鹽基因?qū)胫参铮垣@得高抗鹽的轉(zhuǎn)基因植物，已成為當(dāng)今植物生物技術(shù)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。
　　 本研究首次將耐鹽基因SeNHX1通過根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入大豆，以獲得高耐鹽的抗性植株。由于大豆轉(zhuǎn)基因研究尚未有高效穩(wěn)定的轉(zhuǎn)化系統(tǒng)，本實(shí)驗(yàn)對農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化體系進(jìn)行了進(jìn)一步的探索

2、，確定了一些優(yōu)化的因子，即消毒劑安替福民與濃鹽酸的最佳配比是每一白粒大豆種子用20 ml安替福民和2ml濃鹽酸進(jìn)行滅菌消毒效果最佳，將發(fā)芽率提高到了99％-100％；選擇5 d的無菌苗子葉節(jié)為外植體，進(jìn)行農(nóng)桿菌侵染，獲得的抗性再生苗中嵌合體較少；當(dāng)農(nóng)桿菌與子葉節(jié)共培養(yǎng)時(shí)間為3天時(shí)，其平均芽誘導(dǎo)分化率最好，達(dá)到40％；確定了生根培養(yǎng)基為：1/2 MSB+IBA0.2 mg/L+蔗糖3％+瓊脂0.7％，pH5.8；實(shí)驗(yàn)共轉(zhuǎn)化外植體1226個(gè)