小黑楊單倍體耐鹽基因（Bet-A）遺傳轉(zhuǎn)化的研究.pdf

1、土壤鹽漬化是影響農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境的嚴(yán)重問(wèn)題.植物耐鹽機(jī)理和耐鹽植物的選育研究已成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn).甘氨酸甜菜堿（glycine betaine）是一種重要的調(diào)滲物質(zhì),在鹽脅迫下有些植物能通過(guò)體內(nèi)甘氨酸甜菜堿的積累保護(hù)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,降低細(xì)胞水熱,從而來(lái)增加自身的耐鹽能力.因此甜菜堿合成酶基因被認(rèn)為是最重要和最有希望的鹽脅迫抗性基因.源于大腸桿菌（Escherichia coli）的膽堿脫氫酶（cholinedehydrog

2、enase,CDH）能有效催化甘氨酸甜菜堿的合成.該實(shí)驗(yàn)以農(nóng)桿菌（Agrobacteriumtumefaciens）為介導(dǎo)進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,將編碼CDH的耐鹽基因（Bet-A）導(dǎo)入小黑楊（Populussimonii×P.nigra)單倍體植株（haploid)的基因組內(nèi),以期獲得耐鹽植株.實(shí)驗(yàn)中對(duì)小黑楊單倍體組培系統(tǒng)進(jìn)行了優(yōu)化,并探討了影響轉(zhuǎn)化率的幾個(gè)因素如pH值等.最終得到四個(gè)轉(zhuǎn)化株系,經(jīng)PCR檢測(cè),全部產(chǎn)生特異性擴(kuò)增譜帶,證明Bet-