He-Ne激光和增強(qiáng)UV-B輻射對(duì)小麥幼苗核纖層蛋白B的影響.pdf

1、由于人類活動(dòng)釋放的大量污染氣體長(zhǎng)期存留在大氣中,平流層中的臭氧的催化性破壞導(dǎo)致到達(dá)地面的太陽(yáng)紫外線輻射增強(qiáng),對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育、生理生化、遺傳學(xué)水平都產(chǎn)生了重要影響。因此,揭示UV-B對(duì)作物的損傷及作用機(jī)理,尋找有效的防護(hù)措施顯得尤為重要。激光作為一種新的技術(shù),在生物工程上獲得了廣泛的應(yīng)用。適當(dāng)劑量的激光輻照對(duì)UV-B損傷的幼苗具有一定的修復(fù)作用。小麥作為世界上總產(chǎn)量第二的糧食作物。研究其對(duì)He-Ne激光和增強(qiáng)UV-B輻射的響應(yīng)機(jī)制具有重

2、要的意義。
　　核纖層蛋白B(LaminB)是一種雙功能蛋白質(zhì),也是紡錘體基質(zhì)的重要組成成分,參與細(xì)胞核的組建和紡錘體的組裝。本研究以“ML7113”小麥(Triticumaestivum,cv.)為研究材料,采用低劑量(5mW·mm-2)He-Ne激光輻照增強(qiáng)UV-B輻射(10.08KJ·m-2·d-1)處理后的小麥幼苗,對(duì)各處理組小麥幼苗葉片和根的總蛋白進(jìn)行提取,采用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE)進(jìn)行電泳,并用

3、蛋白印跡技術(shù)(Western Blot)鑒定小麥細(xì)胞中的核纖層蛋白B,分析了He-Ne激光對(duì)增強(qiáng)UV-B輻射引起的小麥核纖層蛋白B相對(duì)含量的影響;通過間接免疫熒光標(biāo)記技術(shù)和激光共聚焦掃描顯微鏡技術(shù),研究了增強(qiáng)UV-B輻射對(duì)小麥核纖層蛋白B分布與定位的影響,從而初步揭示小麥幼苗細(xì)胞中核纖層蛋白B的作用機(jī)理。研究結(jié)果如下:
　　1、經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測(cè)及Western-blot蛋白初步鑒定表明:小麥細(xì)胞中存在核纖層蛋白B。

4、>　　2、通過Quantity One軟件分析Western-blot所檢測(cè)的四個(gè)處理組中小麥核纖層蛋白B含量的結(jié)果,表明:增強(qiáng)UV-B輻射處理組(B),小麥幼苗核纖層蛋白B的含量低于對(duì)照組(CK);單獨(dú)He-Ne激光輻照處理組(L),小麥幼苗核纖層蛋白B的含量低于對(duì)照組(CK)但明顯高于增強(qiáng)UV-B輻射處理組(B);經(jīng)He-Ne激光和增強(qiáng)UV-B輻射復(fù)合處理(BL)后,核纖層蛋白B含量高于單獨(dú)增強(qiáng)UV-B輻射處理組(B),低于單獨(dú)激光

5、處理組(L)。以上結(jié)果說明:一定劑量的增強(qiáng)UV-B輻照對(duì)小麥幼苗核纖層蛋白B造成損傷,激光處理在一定程度上修復(fù)了增強(qiáng)UV-B輻射對(duì)小麥幼苗核纖層蛋白B造成的損傷。
　　3、在對(duì)照組(CK)中,小麥根尖分生區(qū)間期細(xì)胞內(nèi)核纖層蛋白B以絲狀形式分布在細(xì)胞核的周圍;而在分裂前期、中期、后期和末期前期細(xì)胞內(nèi)核纖層蛋白B以解聚形式存在;分裂末期后期,核纖層蛋白B又在形成細(xì)胞膜的位置聚合。
　　4、增強(qiáng)UV-B輻射處理后的小麥根尖分生區(qū)間