抗雞大腸桿菌病單味中藥篩選及其成分的研究.pdf

1、雞大腸桿菌病是由禽致病性大腸埃希氏菌(Avian pathogenic Escherichia coli，APEC)引起的一種細菌性傳染病，較常引起敗血癥、心包心肌炎、全眼球炎、關節(jié)炎、腹膜炎、輸卵管炎和大腸桿菌肉芽腫等。不僅給養(yǎng)雞業(yè)帶來嚴重經濟損失，還給人類健康帶來潛在威脅。該病的防治受到細菌耐藥性、混合感染、繼發(fā)感染等多方面的困擾。近年來，中藥治療雞大腸桿菌病成為研究熱點，并取得一定成果，本文采用體內、外抑菌活性試驗篩選具有抑菌活性

2、的中藥，并對抗雞大腸桿菌有效中藥五味子提取物進行了成分分析。
　　本試驗從2010-2013年山東17地區(qū)疑似發(fā)病雞場進行病料收集、細菌分離鑒定共獲得雞源大腸桿菌83株，并對分離菌株進行血清型和耐藥性檢測，發(fā)現山東主要流行血清型為O24、O15、O18，分別占24.10％、14.46％和10.84％。藥敏試驗結果顯示分離菌對9種常用抗生素氨芐西林、慶大霉素、卡那霉素、鏈霉素、阿米卡星、頭孢唑啉、頭孢他啶、氧氟沙星、環(huán)丙沙星都有一定

3、的耐藥性，耐藥率在32.53％-80.72％。
　　本研究選擇清熱類、祛風類、潤肺止咳類、涼血止血類和收澀藥五類共42味中草藥，乙醇、50％乙醇、蒸餾水依次超聲提取，合并三次提取液，旋轉蒸發(fā)至干，得中藥提取干物質，以環(huán)丙沙星標準品作為對照藥物進行體內、體外抑菌活性篩選。體外抑菌活性試驗采用管碟法測定中藥提取物的抑菌圈直徑，結果顯示夏枯草、黃芩、黃連、金銀花、連翹、板藍根、桔梗、百部、黃精、五味子、烏梅、石榴皮有體外抑菌活性，抑菌圈

4、直徑在6.05mm-27.70mm。體內抑菌試驗采用本試驗室分離的的編號為11-29雞源大腸桿菌分離株作為攻毒菌株。結果顯示五味子對人工感染雞大腸桿菌病理模型有一定療效，五味子治療組的死亡率顯著低于陽性對照組(p＜0.05)，有效率和體增重顯著高于陽性對照組(p＜0.05)，試驗證明中藥五味子對人工感染雞大腸桿菌具有顯著的治療效果。五味子治療組與廣譜抗菌藥環(huán)丙沙星治療組相比，死亡率、有效率和體增重無顯著差異(p＞0.05)，表明中藥五味

5、子在防治雞大腸桿菌病中與廣譜抗菌藥環(huán)丙沙星作用相當。
　　以大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌4種標準菌株和環(huán)丙沙星耐藥及敏感的大腸桿菌分離株為供試菌，以環(huán)丙沙星為對照藥物，采用牛津杯法和試管雙倍稀釋法測定五味子提取物對供試菌株的抗菌活性。結果顯示五味子提取物對所有供試菌都有明顯的抑制作用。五味子提取物對環(huán)丙沙星耐藥菌的抑制作用顯著優(yōu)于環(huán)丙沙星。
　　試驗采用HPLC法對五味子提取物進行成分分析，結果顯示五味子