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1、為了篩選出有效的防治雞致病性大腸桿菌病復(fù)方中草藥超微粉,本試驗(yàn)以篩選的致病性最強(qiáng)優(yōu)勢(shì)血清型地方流行株QH1(O78)建立病理模型,進(jìn)行單味中草藥體外抑菌試驗(yàn),利用雞致病性大腸桿菌病的中獸醫(yī)辨證理論觀點(diǎn),選擇體外抑菌敏感單味中草藥作為主藥,根據(jù)各種單味中草藥配伍中君、臣、佐、使的藥理性質(zhì)組合成復(fù)方中草藥超微粉,通過(guò)體外抑菌試驗(yàn)和人工感染動(dòng)物試驗(yàn)篩選出抑菌效果好的復(fù)方中草藥超微粉,用人工感染14、49日齡雛雞致病性E.coli驗(yàn)證其復(fù)方中草
2、藥超微粉防治效果,并檢測(cè)復(fù)方中草藥超微粉對(duì)人工感染14日齡雛雞致病性E.coli后的免疫機(jī)能指標(biāo)、血清生化指標(biāo),揭示其作用機(jī)理;通過(guò)對(duì)雛雞的急性、亞慢性毒性試驗(yàn)評(píng)價(jià)復(fù)方中草藥超微粉使用的安全性。
本研究的試驗(yàn)結(jié)果如下:
1.從秦皇島地區(qū)不同養(yǎng)雞場(chǎng)分離鑒定出56株E.coli,其中46株分離株為致病性E.coli,占分離菌株的82.1%;46株致病性E.coli屬于11種血清型,以O(shè)78,O89,O142及O1為優(yōu)勢(shì)血
3、清型;46株致病性Ecoli攜帶16種不同毒力基因。根據(jù)E.coli分離菌株的動(dòng)物致病性試驗(yàn)、血清型及毒力基因攜帶情況,篩選出了致病性最強(qiáng)優(yōu)勢(shì)血清型地方流行株QH1(O78)。對(duì)1,14,49日齡雛雞的LD50分別為3.16×106CFU/mL,1.07×107CFU/mL,5×108CFU/mL。
2.單味中草藥體外抑菌試驗(yàn),利用平板瓊脂打孔法和改良微量二倍稀釋-平板法,從26種中草藥中篩選出對(duì)雞致病性E.coli的地方株Q
4、H1(O78)、QH2(O89)、QH4(O1)均敏感的中草藥金銀花、黃連、烏梅、五味子,其抑菌圈直徑在20.3~22.7mm之間,MIC在15.65~31.25mg/mL之間。
3.復(fù)方中草藥超微粉的篩選,利用雞致病性大腸桿菌病的中獸醫(yī)理論辨證理論觀點(diǎn)與各種單味中草藥配伍中的藥理性質(zhì)組合5個(gè)復(fù)方中草藥,通過(guò)體外抑菌和人工感染動(dòng)物性試驗(yàn),篩選出了抑菌效果最好的復(fù)方Ⅲ。
4.復(fù)方中草藥超微粉(復(fù)方Ⅲ)對(duì)人工感染14,4
5、9日齡雛雞致病性E.coli防治試驗(yàn)的結(jié)果顯示,C組(1%禽用頭孢噻呋鈉)和D~F組(復(fù)方Ⅲ添加量分別為1.5%、2.0%、2.5%)的死亡率明顯低于B組(陽(yáng)性對(duì)照組),E組和F組的預(yù)防與治療效果均高于B組與C組,其中以E組對(duì)14,49日齡雛雞致病性大腸桿菌病防治效果最好,保護(hù)率分別為86.7%,90.0%;治愈率分別為92.9%,90.0%;有效率分別為89.7%,93.3%。
5.復(fù)方中草藥超微粉(復(fù)方Ⅲ)對(duì)人工感染14日
6、齡雛雞致病性E.coli血清中生化指標(biāo)、免疫機(jī)能的檢測(cè),A~F組分別在試驗(yàn)后的第7,14,21天采血分離血清進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。結(jié)果顯示,E組(2.0%復(fù)方Ⅲ添加)效果最好,能提高血清中免疫蛋白IgG,IgM,IgA水平;提高血清中LZM,TP,GLB的含量;降低血清中GOT,TG,TC,BUN,UA含量。
6.急性性毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示復(fù)方Ⅲ對(duì)雛雞是無(wú)急性毒副作用,最大耐受量超過(guò)25g/(kg·d)。亞慢性毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示,復(fù)方Ⅲ
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