雞致病性大腸桿菌的藥敏試驗、血清型鑒定及耐藥基因的PCR檢測.pdf

1、2006年9月，從山東省某肉雞集團的五個商品雞場，采集了疑似大腸桿菌病、死雞的肝臟、心臟等樣品76份。經(jīng)過細菌分離培養(yǎng)后，并經(jīng)染色鏡檢、生化試驗、致病性試驗等鑒定均為致病性大腸桿菌。按照美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)的判定標準，對分離得到的76株大腸桿菌進行對24種常用抗生素及其他抗生素藥物的藥敏試驗，結果表明76株均表現(xiàn)出不同的程度的耐藥性，耐藥范圍較廣，其中，耐藥程度最高的是青霉素和氨芐西林，其次是復合磺胺、環(huán)丙氟哌酸、四

2、環(huán)素、利福平、萬古霉素、苯唑青霉素、紅霉素，這9種藥物對76株大腸桿菌低敏或耐藥率達到100.0％，接下來依次為氟哌酸，氯霉素，呋喃妥因，鏈霉素，卡那霉素，慶大霉素，丁胺卡那霉素，頭孢他啶，頭孢噻肟，頭孢呋新，敏感度最高的僅有頭孢哌酮、頭孢唑啉、頭孢三嗪三種藥物。 血清型的測定由揚州大學高崧博士協(xié)助完成，結果在分離得到的76株大腸桿菌中，除各種原因未能定型外，共鑒定出25株分離株的O血清型O41，O78，O29，O76，O5，O

3、14，O104和O63，檢測結果表明O41，O78，O29血清型為該肉雞集團的優(yōu)勢血清型，占定型菌株的68.0％。另外，各分場的血清型存有較大差異，而且同一雞場存有多個不同的血清型。針對此種情況需要各場根據(jù)自己的優(yōu)勢血清型的菌株做自家苗進行預防以有效的控制大腸桿菌的發(fā)生。 從分離得到的76株致病性大腸桿菌篩選出耐氨芐西林和四環(huán)素的菌株，針對β-內酰胺和四環(huán)素耐藥基因分別設計2對特異性引物，對耐藥菌株進行PCR檢測，結果表明TEM

4、基因陽性45株，占60.0％，CTX-M基因陽性35株，占33.3％，且TEM和CTX-M基因均為陽性高達23.5％；tetA基因陽性15株，占22.1％，tetD基因陽性23株，占33.8％；β-內酰胺類和四環(huán)素類交叉耐藥的陽性菌株也占38.2％。此外，耐藥基因測序結果分析表明這4種耐藥基因與Genbank中的相關基因的同源性均高于99.3％，且對應的氨基酸未發(fā)生改變，反映了大腸桿菌的耐藥特性并沒有發(fā)生改變。這說明大腸桿菌耐藥性耐藥譜