哈爾濱地區(qū)豬源致病性大腸桿菌耐藥性分析及基因分型研究.pdf

1、大腸桿菌病是獸醫(yī)臨床上常見(jiàn)的疾病之一，在養(yǎng)豬業(yè)中其主要危害包括仔豬黃痢、仔豬白痢和豬水腫病等，造成了巨大的損失。隨著抗菌藥物在畜牧業(yè)中的廣泛及不規(guī)范使用，細(xì)菌的耐藥性特別是多重耐藥性問(wèn)題日趨嚴(yán)重。
　　 與發(fā)達(dá)國(guó)家相比，我國(guó)大腸桿菌的耐藥形式更為嚴(yán)峻，國(guó)內(nèi)圍繞大腸桿菌耐藥性也做了不少研究，但多數(shù)停留在耐藥性和耐藥基因的檢測(cè)上，對(duì)致病性大腸桿菌質(zhì)粒的分析及不同地區(qū)致病性大腸桿菌的遺傳相關(guān)性缺乏深入的、全面的認(rèn)識(shí)。哈爾濱地區(qū)豬源致病

2、性多重耐藥大腸桿菌的流行、危害以及不同地區(qū)多重耐藥性大腸桿菌的遺傳相關(guān)性未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。
　　 本試驗(yàn)依據(jù)CLSI(2007)推薦的紙片擴(kuò)散法檢測(cè)了48株分離自規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)的致病性大腸桿菌對(duì)14種常用抗菌藥物的耐藥性，分析比較致病性大腸桿菌對(duì)各種抗菌藥物的多重耐藥情況和耐藥率。試驗(yàn)結(jié)果表明:48株致病性大腸桿菌均表現(xiàn)為多重耐藥;多重耐藥菌株主要表現(xiàn)為3～12耐，對(duì)復(fù)方新諾明、氟苯尼考的耐藥率高達(dá)89％以上，對(duì)多西環(huán)素、鏈霉素、鏈霉

3、素、氯霉素、恩諾沙星、慶大霉素、阿莫西林/克拉維酸的耐藥率都超過(guò)了50％，對(duì)阿米卡星、磷霉素、多粘菌素B相對(duì)敏感，磷霉素和多粘菌素B的耐藥率僅僅只有2.1％和0。
　　 對(duì)48株大腸桿菌菌株進(jìn)行了質(zhì)粒圖譜分析，通過(guò)堿式裂解法小量提取質(zhì)粒，然后對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行了瓊脂糖凝膠電泳分析，并用HindⅢ限制性內(nèi)切酶對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行了酶切分析。結(jié)果表明:質(zhì)粒獲得率為100％，來(lái)源相同的菌株具有相同或相似的質(zhì)粒圖譜，具有一定的遺傳相關(guān)性，而來(lái)源不同的菌株

4、的質(zhì)粒圖譜一般不同，屬于不同克隆。
　　 采用脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)對(duì)48株豬源致病性多重耐藥大腸桿菌進(jìn)行分型研究，并將其結(jié)果與耐藥表型和質(zhì)粒圖譜結(jié)果相比較。結(jié)果表明:48株大腸桿菌共可分為18個(gè)PFGE型別，大多數(shù)型別又可分為不同亞型。同一養(yǎng)殖場(chǎng)不同耐藥表型的菌株和質(zhì)粒圖譜的菌株都存在PFGE圖譜完全相同的現(xiàn)象，通過(guò)對(duì)質(zhì)粒圖譜和脈沖場(chǎng)凝膠電泳圖譜的結(jié)果分析可以發(fā)現(xiàn):分離自哈爾濱周邊地區(qū)同一發(fā)病養(yǎng)豬場(chǎng)的大腸桿菌具有一定的遺傳