牛源大腸桿菌毒素基因、黏附素基因、O血清型及耐藥性調(diào)查.pdf

1、大腸桿菌是大腸桿菌科、埃希氏菌屬的成員，是Escherich在1885年發(fā)現(xiàn)的，一直被認(rèn)為是腸道中的正常菌群，不會致病。到了20世紀(jì)中葉，發(fā)現(xiàn)在動物和人，特別是幼齡動物和嬰兒，大腸桿菌的一些血清型有一定的致病性，往往會引起嚴(yán)重腹瀉和敗血癥，無論在發(fā)達(dá)國家還是在發(fā)展中國家，大腸桿菌導(dǎo)致的腹瀉疾病仍然是一個嚴(yán)重威脅人類健康和導(dǎo)致病畜生長發(fā)育遲緩，生產(chǎn)性能降低，甚至死亡，嚴(yán)重?fù)p害養(yǎng)殖業(yè)的重要因素。
　　本研究針對黑龍江省不同地區(qū)的不同牛

2、場，共采集108頭犢牛腹瀉糞便病料。通過麥康凱培養(yǎng)基與伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基的聯(lián)合培養(yǎng)，利用16S rRNA通用引物進(jìn)行PCR檢測與序列分析，并結(jié)合傳統(tǒng)大腸桿菌生化試驗(yàn)鑒定方法，共分離、鑒定出88株大腸桿菌，并對其進(jìn)行了毒素基因(Eae+Stx1+Stx2+bfpA+LT+Sta+Stb+)與黏附素基因(k88+k99+F17+F6+F18+F41+)檢測、O血清型篩選以及耐藥性分析。
　　研究結(jié)果表明:共有38株大腸桿菌檢測出毒素基因，

3、檢出率為43.18％，可分為11種毒素類型，以eae、sta、stb、bfpA4種為主要類型，分別為13株、8株、15株和16株。以基因型為基礎(chǔ)，可將這些大腸桿菌分為5種類型:ETEC、非典型EPEC、典型EPEC、ETEC/EPEC以及ETEC/EHEC。其中ETEC共檢出15株，占毒素基因陽性菌株的39.47％。共有60株菌株表達(dá)一種或多種黏跗素，檢出率為68.18％。本研究共檢出11種黏附素類型，其中以F18和K88黏附素類型為主

4、，分別占黏附素陽性菌株的53.33％和20％。采用血清凝集實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了19種常見致病性O(shè)血清型的檢測，共檢出14種血清型，優(yōu)勢血清型為O2，O125和O128。通過藥敏實(shí)驗(yàn)可知分離菌株呈多重耐藥，對三種或更多抗生素產(chǎn)生耐藥性，其中，對利福平(96.6％)、阿莫西林(97.7％)和氨芐西林(97.7％)表示強(qiáng)耐藥性，對慶大霉素(30.7％)、氧氟沙星(30.7％)、環(huán)丙沙星(33.0％)和萘啶酸(37.5％)較敏感。
　　本研究表明，