洋蔥可視化標(biāo)記基因遺傳轉(zhuǎn)化與再生研究.pdf

1、洋蔥(AlliumcepaL.)是世界上最重要的蔬菜作物之一，具有較高的食療價值。營養(yǎng)品質(zhì)一直是洋蔥育種追求的主要目標(biāo)，基因工程的發(fā)展為洋蔥的育種開辟了一條新的途徑，它可以克服常規(guī)植物育種無法解決的農(nóng)藝性狀改良及環(huán)境適應(yīng)問題，已成為改良植物性狀、培育新品種的有效分子育種手段。本研究利用洋蔥生長初期的胚芽為外植體材料，建立了轉(zhuǎn)化外植體再生體系，并以此為基礎(chǔ)，將花青素合成轉(zhuǎn)錄因子基因（Bi和C1）轉(zhuǎn)入洋蔥愈傷組織，經(jīng)過草甘膦抗性篩選，獲得了

2、轉(zhuǎn)基因植株，對這些材料進行了PCR鑒定和初步分析。本研究主要取得以下結(jié)果:
　　1、利用成熟的洋蔥種子萌發(fā)獲得的胚芽作為外植體材料，MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，探究洋蔥基因型、植物生長調(diào)節(jié)劑、草甘膦對洋蔥再生過程的影響，構(gòu)建了洋蔥再生體系。在相同的誘導(dǎo)條件下，比較了四個洋蔥品種，結(jié)果表明，不同洋蔥品種的愈傷組織誘導(dǎo)率有顯著差異。愈傷組織誘導(dǎo)的最佳激素組合為4mg/L2，4-D+1mg/L6-BA，得到最高誘導(dǎo)率為72.1％。胚性愈傷誘

3、導(dǎo)的最佳組合為2mg/L2，4-D+2mg/L6-BA+5mg/LAgNO3，最高誘導(dǎo)率為72.8％。最佳分化培養(yǎng)基為1mg/LTDZ+0.5mg/LNAA+7.5mg/LAgNO3，愈傷分化率為82.7％。分化培養(yǎng)基中加入1.0mg/L草甘膦，可完全抑制愈傷分化。在1/2MS+0.01mg/LNAA培養(yǎng)基上可誘導(dǎo)生根，生根率為100％。再生苗馴化移栽成活率達到95％。草甘膦抗性田間試驗表明，草甘膦對洋蔥幼苗的致死濃度為0.5‰。