煙草新病害—莖黑腐病及安徽省煙田土壤幾種病原物的分子檢測(cè)研究.pdf

1、煙草是安徽省重要的經(jīng)濟(jì)作物，病害的發(fā)生一直是影響其優(yōu)質(zhì)穩(wěn)產(chǎn)的重要限制因素。根莖類病害是影響煙草生長(zhǎng)的一大類病害，尤其在多年連作影響下，根莖部病害對(duì)煙草生長(zhǎng)和煙葉品質(zhì)有極大的危害。安徽省煙草根莖部病害主要有青枯病、黑脛病、根黑腐病等。由于煙草連作，煙株根際附近微生物群落的演變更替，土傳病害種類也逐年增加。2011-2012年我們?cè)诎不帐∷膫€(gè)縣采集病株和病田土壤，對(duì)皖南煙草產(chǎn)區(qū)發(fā)生的一種新的病害—煙草莖黑腐病病組織進(jìn)行分離、純化及病原鑒定。

2、
　　由于煙草根莖類病害種類較多，且常?；旌习l(fā)生，給病害診斷造成較大困難，本研究利用分子檢測(cè)方法對(duì)煙草根莖類病害進(jìn)行檢測(cè)，明確了安徽省煙區(qū)主要根莖病害種類，為煙草病害的防治提供理論依據(jù)，對(duì)煙草的穩(wěn)產(chǎn)優(yōu)質(zhì)和持續(xù)發(fā)展具有重要意義。通過(guò)上述研究，結(jié)果如下:
　　1、對(duì)安徽省煙草主產(chǎn)區(qū)的煙草根莖病害進(jìn)行了系統(tǒng)的調(diào)查與鑒定，描述了病害發(fā)生的癥狀和對(duì)煙草造成的危害。煙草莖黑腐病害的主要癥狀表現(xiàn)為煙草根莖部變黑，拔出感病煙株可見(jiàn)根部變黑腐

3、爛，后期葉子變黃，萎蔫下垂，嚴(yán)重時(shí)整株枯死。
　　2、采用組織分離法對(duì)發(fā)病組織進(jìn)行分離，獲得175株真菌性分離物。通過(guò)在顯微鏡下觀察分離物的孢子形態(tài)、顏色、產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)等，根據(jù)分離率的大小把分離物初步劃分為三大類:一類為鏈格孢，另外兩類為鐮刀菌。
　　3、通過(guò)室內(nèi)接種試驗(yàn)，確定病原菌。對(duì)編號(hào)為Mz01的致病菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)檢測(cè)，鑒定引起煙草莖黑腐病的病原為層出鐮刀菌（Fusariumproliferatum）。

4、　　4、對(duì)編號(hào)為Mz01的致病菌株進(jìn)行了生物學(xué)特性研究。Mz01菌株生長(zhǎng)溫度為12～32℃，最適生長(zhǎng)溫度為26℃，高于36℃則停止生長(zhǎng)，在pH4.0～10.0均能生長(zhǎng)，pH6為最適生長(zhǎng)的酸堿度，最適生長(zhǎng)碳源為蔗糖，氮源為甘氨酸，碳源對(duì)該菌營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的影響較為穩(wěn)定，而氮源對(duì)其營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)影響的變幅較大。
　　5、采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定了3-羥基-5-甲基異惡唑、多菌靈、甲基托布津和代森錳鋅4種殺菌劑對(duì)致病菌株Mz01的室內(nèi)抑菌效果，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)

5、果進(jìn)行回歸分析。結(jié)果表明，4種藥劑對(duì)煙草莖黑腐病菌的EC50分別為0.2183、0.5124、5.4179和20.9545mg/L，EC90分別為1.2849、1.9912、221.2679和773.7263mg/L。根據(jù)EC50和EC90確定最好的兩種用藥為3-羥基-5-甲基異惡唑和多菌靈。
　　6、10種不同煙草品種的抗性研究結(jié)果表明，云煙97抗病性最好，病情指數(shù)為11.13，紅花大金元病情指數(shù)最高，為97.72，其余8種抗病