三種揮發(fā)性芳香物質(zhì)對柑橘采后酸腐病菌作用初探.pdf

1、酸腐病是一種嚴重的柑橘采后病害。近幾年來，由于大多數(shù)地方加強了對于青、綠霉病這二種病害的防治后，柑橘酸腐病在各地的發(fā)病率逐漸提高，并且有著爆發(fā)的趨勢。本實驗分離純化得到一株病原菌并鑒定，研究了其基礎(chǔ)生物學特性。GC-MS分析了不同貯藏時間椪柑精油組成并探討了上述精油和主要潛在抑菌組分對酸腐病菌的抑菌作用以及機理。具體結(jié)果如下：
　　（1）酸腐病菌分離鑒定和致病性檢測以及基礎(chǔ)生物學特性
　　本實驗從自然發(fā)病的宮川果實表面分離分

2、離純化得到一株柑橘采后致病菌，并根據(jù)形態(tài)學特征和 rDNA-ITS相結(jié)合的方法鑒定為酸腐病菌(Geotrichum citri-aurantii)。致病力檢測結(jié)果顯示酸腐病菌從發(fā)病到全果腐爛只需11 d；基礎(chǔ)生物特性研究結(jié)果顯示：菌絲體最適生長溫度28°C；在pH為4.0時菌絲體生長旺盛；孢子致死溫度為85°C；此外光照對菌絲體生長作用不明顯。
　?。?）不同貯藏時間椪柑皮精油成分GC-MS分析及抑菌作用
　　選取椪柑作為實

3、驗材料，采用水蒸汽蒸餾法提取不同貯藏時間椪柑皮精油，并進行GC-MS分析。結(jié)果顯示，不同貯藏時間椪柑精油的主要化學成分萜烯烴類化合物（89.18％~90.82%）、醇(4.89%~5.54%)、醛(4.22%~5.28%)和醚(0%~0.10%)等；其中，含量最高的組分為檸檬烯(62.50%～63.33%)，約占總含量的三分之二。不同貯藏時間椪柑精油抑菌試驗結(jié)果表明：在0~10μL/mL時，貯藏5、10和15 d的精油都是促進酸腐病菌菌

4、絲體的生長，但是隨著濃度的增加，這種促進效果減弱了。當10 d椪柑精油濃度為10μL/mL時，促進作用最小(0.71%)。當5 d椪柑精油濃度為5μL/mL時，促進作用最大(42.22%)。當20 d椪柑精油濃度為10μL/mL，抑制率為7.06%。
　?。?）六種揮發(fā)性芳香物質(zhì)對酸腐病菌的抑菌作用
　　采用濾紙片法對檸檬醛、辛醛、壬醛、癸醛、松油醇、芳樟醇、β-蒎烯的抑菌活性進行了初步的篩選。結(jié)果顯示：在醛類中，檸檬醛和辛

5、醛對供試菌都顯示了很強的抑菌活性；在醇類中，α-松油醇顯示了比較強的抑菌活性。這三種芳香物質(zhì)的MIC和MFC結(jié)果如下：檸檬醛(MIC：0.50μL/mL，MFC：1.00μL/mL)；辛醛(MIC：0.50μL/mL，MFC：2.00μL/mL)和α-松油醇(MIC：2.00μL/mL，MFC：4.00μL/mL)。選出檸檬醛、辛醛和α-松油醇進行抑菌機理的研究。
　?。?）檸檬醛、辛醛和α-松油醇對酸腐病菌的抑菌機理研究

6、　　經(jīng)過最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MFC)的檸檬醛、辛醛和α-松油醇處理后，通過菌絲體的掃描電鏡圖片觀察到菌絲體形態(tài)學發(fā)生了很大的改變，細胞質(zhì)出現(xiàn)了不同程度的泄漏;細胞物質(zhì)在260 nm下發(fā)生大量釋放，并隨著濃度增加而增加，在MFC檸檬醛處理2 h達到了最大吸收度(0.636);胞外電導率顯著增加和胞外pH的變化驗證了細胞膜的通透性增加了;細胞總脂質(zhì)含量降低，其中，檸檬醛、辛醛和α-松油醇濃度MFC處理的酸腐霉菌細胞內(nèi)脂質(zhì)含