廣西靖西壯族端午藥市植物地膽草和毛大丁草的研究.pdf

1、隨著組合化學(xué)在藥物研發(fā)中不足處的呈現(xiàn)以及天然產(chǎn)物分離與鑒定技術(shù)的飛速發(fā)展，天然產(chǎn)物的研究在新藥開發(fā)中受到更多的重視，而作為天然產(chǎn)物研發(fā)重要來源的民間傳統(tǒng)藥用植物及傳統(tǒng)藥用知識也受到了更多的關(guān)注。我國豐富的傳統(tǒng)藥用植物資源及上千年積累的民族傳統(tǒng)藥用知識，為我國天然產(chǎn)物研究提供了巨大寶庫。
　　 本研究通過民族植物學(xué)方法（關(guān)鍵人物訪談、半結(jié)構(gòu)式訪談、參與式農(nóng)村評估）對靖西端午藥市的藥用植物進行了包括傳統(tǒng)用途、使用方法、使用部位等多方

2、面?zhèn)鹘y(tǒng)知識的調(diào)查研究;得知兩種菊科植物地膽草(Elephantopusscarber L.)和毛大丁草(Gerbera piloselloides(L.) Cass.)在靖西當?shù)貞?yīng)用廣泛，且均有較好的治療效果;同時毛大丁草除作為藥用植物之外還作為食用植物，這一調(diào)查結(jié)果促使選擇該兩種植物作為實驗室研究材料。我們進一步運用，植物化學(xué)分離技術(shù)（常壓硅膠色譜法、凝膠色譜法、高速逆流色譜、高效液相色譜等）分離提取兩種藥用植物中的化學(xué)成分，并利用波

3、譜分析技術(shù)(NMR、MS和IR等光譜學(xué)手段)確定化合物結(jié)構(gòu);進而利用生物學(xué)活性測定方法（ABTS抗氧化和細胞毒性）及計算機模擬活性篩選技術(shù)對部分分離得到的化合物的生物活性進行了研究;以期在運用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段對地膽草和毛大丁草驗證傳統(tǒng)知識合理性的同時，并為傳統(tǒng)知識的傳承與保護提供科學(xué)依據(jù)，同時也為對兩種民間藥用植物開展深入的研究提供參考及依據(jù)。
　　 本研究運用多種色譜技術(shù)（正反相硅膠色譜、凝膠色譜、MCI柱色譜等）對地膽草全草

4、的石油醚層及乙酸乙酯層提取物進行了化學(xué)成分的分離與提取，得到包括δ-truxinate類、倍半萜烯內(nèi)酯類、黃酮類在內(nèi)的8個單體化合物;進一步利用NMR、MS、IR等現(xiàn)代波譜技術(shù)，確定了8個化合物的結(jié)構(gòu);其中化合物8被確定為新的δ-truxinate類天然產(chǎn)物。運用ABTS清除自由基實驗并以維生素E為對照測定了部分化合物的抗氧化活性，其結(jié)果顯示:該新化合物具有較強的抗氧化活性(IC50=0.57 mg/mL);其次運用MTT法，以去甲斑蝥

5、素(NCTD，10.0 mg/mL)為陽性對照品，測定了新化合物對HepG2細胞的細胞毒性，結(jié)果表明該化合物對HepG2細胞具有顯著的劑量依賴抑制活性(IC50=24.0 mg/mL)。本研究還運用Discovery Studio軟件的反向找靶(TargetFishing)功能、結(jié)合蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(PDB database)對化合物8的生物活性進行了篩選，結(jié)果表明該化合物具有抗炎、抗菌及抗腫瘤等潛在的生物活性，指明以后對該化合物的活性篩選

6、應(yīng)圍繞其抗炎、抗菌及抗腫瘤等活性來進行。
　　 本研究運用ABTS抗氧化活性引導(dǎo)(Activity-guided)方法，通過分析比較各提取分離層的抗氧化活性的大小，并結(jié)合大孔樹脂色譜、凝膠色譜、HPLC等分離技術(shù)分離毛大丁草提取物中的抗氧化活性成分;最終得到包括黃酮類、奎寧酸類及香豆素類在內(nèi)的10個化合物，運用NMR、MS和IR等波譜學(xué)方法確定化合物結(jié)構(gòu)。其中化合物5為首次從植物中分離得到的Parasorbosid類天然產(chǎn)物;同