湛江近海域沉積物中DlPCBs對(duì)斑馬魚胚胎組織結(jié)構(gòu)和CYP1A的影響.pdf

1、類二噁英多氯聯(lián)苯（dioxin-like polychlorinated biphenyls，DlPCBs）來源廣泛，在環(huán)境中半衰期長，對(duì)生物機(jī)體具有多種毒性。海洋沉積物中的DlPCBs能被食物鏈底端生物吸收并隨食物鏈富集放大，蓄積于魚類體內(nèi)，污染魚粉和海產(chǎn)食品原料，對(duì)動(dòng)物和人類健康形成威脅。采用生物學(xué)方法進(jìn)行DlPCBs檢測更加方便快捷，能直接反映DlPCBs對(duì)生物機(jī)體的毒害作用。目前利用斑馬魚胚胎病理組織學(xué)變化和CYP1A為標(biāo)志物，

2、進(jìn)行海洋沉積物DlPCBs的生物學(xué)檢測尚未見報(bào)道。為揭示海洋沉積物中DlPCBs對(duì)斑馬魚胚胎組織學(xué)和CYP1A的影響，探索以斑馬魚胚胎為指示生物的生物學(xué)檢測技術(shù)，本研究提取、分離湛江近海域沉積物中DlPCBs，進(jìn)行了如下試驗(yàn)：
　?。?）用GC-ECD(配有電子捕獲檢測器的氣相色譜)儀器分析法，對(duì)湛江近海域沉積物 DlPCBs污染狀況進(jìn)行調(diào)查分析。（2）以供試斑馬魚胚胎的心包、卵黃囊、魚鰾等發(fā)育情況和胚胎死亡為觀測指標(biāo)，研究不同濃

3、度DlPCBs提取物對(duì)斑馬魚胚胎致畸（亞致死）和致死毒性效應(yīng)。（3）觀察供試斑馬魚胚胎暴露于DlPCBs提取物后的病理組織學(xué)變化，探索DlPCBs提取物對(duì)斑馬魚發(fā)育早期的毒性作用靶器官。（4）用DlPCBs提取物染毒斑馬魚胚胎96h后，檢測仔魚體內(nèi)7-乙氧基-異吩唑酮-脫乙基酶（7-ethoxyresorufin-O-deethylase，EROD）活性和細(xì)胞色素P4501A（cytochrome4501A，CYP1A）基因mRNA相對(duì)

4、表達(dá)量的變化，探究湛江近海域沉積物中DlPCBs提取物對(duì)斑馬魚胚胎的毒性作用機(jī)理。結(jié)果表明：
　?。?）采用超聲波提取和佛羅里土柱凈化相結(jié)合方法制備沉積物DlPCBs提取物，經(jīng)GC-ECD儀器分析檢測，發(fā)現(xiàn)湛江近海域沉積物存在DlPCBs污染，其中調(diào)順島附近海域沉積物中DlPCBs含量達(dá)45ng/g。
　　（2）DlPCBs提取物對(duì)斑馬魚胚胎具有較強(qiáng)的致畸性和致死性，能誘發(fā)斑馬魚胚胎心包水腫、卵黃囊水腫和脊柱彎曲，以及胚胎死

5、亡。胚胎異常率、死亡率均呈現(xiàn)DlPCBs提取物濃度依賴性。
　?。?）DlPCBs提取物導(dǎo)致供試斑馬魚仔魚鰓絲發(fā)生水樣變性、腮小片上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎，甚至脫落；使肝細(xì)胞萎縮、壞死，并導(dǎo)致肝糖原消耗的加速；使腸道上皮細(xì)胞發(fā)生輕微水腫以及心包和卵黃囊發(fā)生水腫等。DlPCBs提取物對(duì)斑馬魚發(fā)育早期的主要毒性靶器官為肝臟和鰓絲。觀測斑馬魚仔魚肝臟和鰓絲病理組織學(xué)變化，能在一定程度上對(duì)DlPCBs提取物的毒性大小及其作用方式進(jìn)行評(píng)價(jià)。