鐵皮石斛兩步培養(yǎng)法及有效成分積累的研究.pdf

1、鐵皮石斛(Dendrobium off icinale Kimura et Migo)又稱鐵皮蘭，隸屬于蘭科（Orchidaceae）石斛屬(Dendrobium)，多年生附生型草本植物，新鮮或干燥莖入藥，其藥效成分主要為多糖(Polysaccharide)和生物堿(Alkaloid)等。鐵皮石斛種子單獨(dú)栽種發(fā)芽率相當(dāng)?shù)停c真菌類共生才能發(fā)芽。所以用栽種普通植物的傳統(tǒng)方法種植石斛類的種子很難保證生長量。加之鐵皮石斛多生長于陰濕環(huán)境中，自

2、然生長和人工栽培十分緩慢，收獲產(chǎn)量低，供不應(yīng)求。近年來人們開展了大量有關(guān)鐵皮石斛組織培養(yǎng)的研究，成功進(jìn)行了鐵皮石斛分化誘導(dǎo)和快速繁殖。然而，試管苗雖然繁殖系數(shù)高、生長快，但往往有效成分含量低，且植物體內(nèi)有較高植物生長調(diào)節(jié)劑殘留，影響用藥安全。組織培養(yǎng)能加快繁殖和促進(jìn)試管苗生長，使生物產(chǎn)量快速增加;腐殖質(zhì)土栽培能促進(jìn)有效成分合成。本實(shí)驗(yàn)將組織培養(yǎng)繁殖系數(shù)高、生長快的優(yōu)勢(shì)與土壤栽培利于有效成分合成、用藥安全優(yōu)勢(shì)相結(jié)合，建立一種鐵皮石斛的階段

3、式培養(yǎng)和栽培模式，結(jié)果如下:
　　1.以微扦插的方式接種組培苗，其效果優(yōu)于傳統(tǒng)組織培養(yǎng)。生長激素和細(xì)胞分裂素組合下效果較好的為1/2MS+0.5mg/LNAA+1.0mg/L6-BA，芽莖生長旺盛，顏色呈綠色，有光澤。在培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)40d，莖段莖節(jié)處長出側(cè)芽，平均生物量增長4.52g/株。在鐵皮石斛組培茁壯苗生根的過程中，1/2MS+0.5mg/LNAA+1.5mg/L6-BA的組合對(duì)鐵皮石斛組培苗壯苗生根最有利，組培苗生長旺

4、盛，健壯整齊，顏色深綠。比傳統(tǒng)的組織培養(yǎng)時(shí)間短，同時(shí)又達(dá)到了組培快繁生產(chǎn)試管苗的目的。
　　2.鐵皮石斛組織培養(yǎng)過程中適宜PH值為5.6，溫度控制在25±1℃最合適，此溫度下組培苗生長情況最佳，但試管苗栽培時(shí)溫度在15-28℃，這樣有利于有效成分的累積;鐵皮石斛的生長對(duì)光照的要求較嚴(yán)，組培過程光照控制在1400Lx左右，光照時(shí)間12h/d，此光照下組培苗生長良好，鐵皮石斛試管茁壯苗生根時(shí)光照控制在3000Lx左右，光照時(shí)間12h/

5、d,在此光照下芽苗生長旺盛，顏色呈深綠，根健壯整齊。
　　3.實(shí)驗(yàn)室模仿適宜鐵皮石斛試管苗生長的溫度、光照強(qiáng)度和光照時(shí)間。夜間溫度在15-18℃，白天溫度25-28℃，適合鐵皮石斛次生代謝產(chǎn)物的積累。光照在7500Lx、光照時(shí)間12h/d條件下鐵皮石斛生長旺盛，苗呈深綠色。每月噴灑一次含有大量元素的營養(yǎng)液，以1/3倍的標(biāo)準(zhǔn)液最佳，噴灑前調(diào)營養(yǎng)液PH值為5.6。
　　4.組織培養(yǎng)能加快繁殖和促進(jìn)試管苗生長，使生物產(chǎn)量快速增加;