日糧模式對(duì)瘤胃與后腸中生物胺生成的影響.pdf

1、瘤胃液中生物胺主要是由相關(guān)瘤胃微生物產(chǎn)生的酶，或飼料原料中固有的酶，催化瘤胃液中游離氨基酸脫羧基生成。近年的研究表明，當(dāng)反芻動(dòng)物飼喂高精料日糧時(shí)，其日糧中可發(fā)酵碳水化合物和可降解蛋白會(huì)在瘤胃中微生物的作用下快速降解產(chǎn)生VFA和乳酸等酸性介質(zhì)，從而破壞瘤胃正常的酸堿平衡，使瘤胃pH下降和屏障功能的破壞，進(jìn)而使一些原來(lái)不容易通過(guò)瘤胃上皮的機(jī)體異常代謝物質(zhì)相對(duì)較容易的通過(guò)上皮屏障進(jìn)入血液，進(jìn)而對(duì)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生危害。另外，精料快速發(fā)酵產(chǎn)生的酸性介

2、質(zhì)會(huì)改變瘤胃內(nèi)的微生物區(qū)系，使產(chǎn)生生物胺的微生物菌群數(shù)量增加，進(jìn)而使瘤胃液中生物胺含量增加，而瘤胃上皮屏障的受損，可能會(huì)使進(jìn)入血液中的生物胺的含量增加，為充分了解日糧精料對(duì)瘤胃及血液中生物胺含量的影響，為奶牛的科學(xué)飼喂提供理論依據(jù)。本論文首先建立了高效液相色譜法測(cè)定瘤胃液和血液中生物胺的方法，再通過(guò)普查試驗(yàn)測(cè)定了飼喂高精料奶牛血液中的生物胺含量。然后，比較了飼喂不同精粗比日糧的奶牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)、產(chǎn)奶性能、瘤胃中產(chǎn)生生物胺細(xì)菌數(shù)量、采食量

3、、以及瘤胃液、血液和糞中的生物胺含量的差異，以研究高精料日糧對(duì)瘤胃代謝、瘤胃上皮完整性和動(dòng)物生產(chǎn)性能的影響。最后，我們通過(guò)測(cè)定飼喂不同精粗比日糧山羊瘤胃液、瘤胃靜脈血、盲腸內(nèi)容物和盲腸靜脈血中生物胺含量的改變，以研究瘤胃上皮和盲腸上皮的完整性、以及生物胺吸收的腸道區(qū)段。
　　 1.反相高效液相色譜法測(cè)定瘤胃液中的生物胺
　　 應(yīng)用反相高效液相色譜法，建立了瘤胃液中5種生物胺的測(cè)定方法。樣品經(jīng)0.5mol/L鹽酸提取后，用

4、丹磺酰氯柱前衍生，流動(dòng)相為乙腈和0.1 mol/L乙酸銨溶液，采用梯度洗脫，流速為1.0 mL/min，紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)254 nm，柱溫30℃。結(jié)果表明，采用該方法，色胺、腐胺、甲胺、組胺、酪胺五種生物胺能在40 min內(nèi)得到良好分離，回收率在88.46％-98.49％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10％。應(yīng)用上述方法，研究了高精料和低精料日糧條件下瘤胃液中5種生物胺濃度的差異。結(jié)果表明，在高精料日糧條件下，飼喂前山羊瘤胃液中的酪胺和甲胺濃度顯

5、著高于低精料日糧(P＜0.05)，但在組胺、色胺和腐胺濃度方面，二者未有顯著性差異(P＜0.05)。結(jié)果顯示，該方法可用于瘤胃液中的生物胺的分析，且飼喂前山羊瘤胃液中的酪胺和甲胺濃度受日糧精粗比值的影響。
　　 2.西崗、長(zhǎng)豐和上海牧場(chǎng)奶牛靜脈血中生物胺濃度及其與產(chǎn)奶量、乳成分及糞中VFA濃度的相關(guān)性研究
　　 為闡明我國(guó)當(dāng)前主要飼養(yǎng)模式下奶牛血液中生物胺的含量及其與產(chǎn)奶量間的相關(guān)性。本試驗(yàn)選取，西崗、長(zhǎng)豐和上海三個(gè)飼喂

6、精粗比分別是65∶35、70∶30和60∶40的牛場(chǎng)，分別采用頸靜脈采集血液，同時(shí)收集糞便，采用高效液相色譜法測(cè)定其生物胺的含量，采用氣相色譜法測(cè)定了揮發(fā)性脂肪酸的含量，同時(shí)針對(duì)生物胺與產(chǎn)奶量及VFA之間的相關(guān)性進(jìn)行分析。試驗(yàn)結(jié)果表明，生產(chǎn)奶牛血液中存在一定濃度的生物胺;而相關(guān)性分析結(jié)果表明，奶牛血液中生物胺含量與產(chǎn)奶量、乳蛋白及乳脂率之間均不存在顯著相關(guān)（P＞0.05）;除長(zhǎng)豐和上海牧場(chǎng)糞便中的總VFA和乙酸，及長(zhǎng)豐與西崗和上海的戊酸

7、濃度差異顯著(P＜0.05)外，其它VFA在不同牧場(chǎng)間并不存在顯著性差異(P＞0.05），同時(shí)總揮發(fā)性脂肪酸及其組成與血液中生物胺量之間并不呈顯著相關(guān)（P＞0.05）。結(jié)果顯示，在中國(guó)當(dāng)前奶牛飼養(yǎng)模式下，奶牛血液中存在一定濃度的酪胺、腐胺、組胺、甲胺和色胺，其可能影響動(dòng)物健康。
　　 3.高精料日糧對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵及瘤胃液、外周血液和糞中生物胺含量的影響
　　 為研究飼喂高精料日糧條件下奶牛瘤胃液、外周血液和糞中生物胺含量

8、和產(chǎn)生生物胺的微生物數(shù)量的改變，以及瘤胃發(fā)酵參數(shù)、瘤胃液pH與瘤胃液、血液和糞中生物胺含量的關(guān)系，試驗(yàn)選取4頭初產(chǎn)(泌乳60-140d)的健康荷斯坦奶牛，采用2×2交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)。試驗(yàn)期為21d，包括:11d的適應(yīng)期和10d的采樣期。試驗(yàn)日糧為含40％（低精料組;對(duì)照組）和70％（高精料組）精料的日糧。在采樣期的第1、4、6和10d采集瘤胃液用來(lái)測(cè)定pH、VFA、NH3-N、乳酸和生物胺的含量;另外在采樣期的第1、4、6和10d的上午采食

9、前15min和采食后4和8h通過(guò)尾靜脈采血，測(cè)定生物胺含量;在采樣期的第1、4、6和10d的飼喂前15min采集糞樣，測(cè)定糞樣中生物胺含量。結(jié)果顯示，飼喂高精料顯著提高了奶牛瘤胃液中乳酸、總VFA、丁酸、戊酸和總支鏈VFA的含量，同時(shí)乙丙比顯著降低，但未能顯著降低乙酸和NH3-N水平;同時(shí)，與飼喂低精料相比，飼喂高精料的奶牛的糞中和瘤胃液中的生物胺含量呈顯著增加(P＜0.05)，同時(shí)外周血液中生物胺含量亦顯著增加(P＜0.05)。相關(guān)性

10、分析結(jié)果表明:瘤胃液pH與瘤胃液、血液中生物胺含量，以及糞pH與糞中生物胺含量呈顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），但瘤胃液pH和糞中生物胺含量無(wú)顯著相關(guān)（P＞0.05）。高精料日糧顯著提高了瘤胃液中的乳酸菌數(shù)量（P＜0.05），但對(duì)牛鏈球菌數(shù)量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。結(jié)果表明:飼喂高精料能促進(jìn)消化道內(nèi)生物胺的生成與轉(zhuǎn)移，提高乳酸菌數(shù)量。然而，有關(guān)生物胺和生物胺生成菌在動(dòng)物生理活動(dòng)中的作用，特別是在炎癥應(yīng)答中的作用，尚需進(jìn)一步研究。

11、　　 4.高精料日糧對(duì)山羊瘤胃、瘤胃靜脈、盲腸與盲腸靜脈中生物胺濃度的影響研究
　　 為研究高精料日糧對(duì)瘤胃液和瘤胃靜脈血、盲腸內(nèi)容物和盲腸靜脈血中生物胺含量的影響，同時(shí)探討二者的相關(guān)性。本研究以山羊?yàn)槟Ｐ蛣?dòng)物，實(shí)驗(yàn)選用6頭裝有永久性瘺管的本地閹割山羊，采用隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，每組隨機(jī)選取3只山羊，實(shí)驗(yàn)期為24天。在試驗(yàn)期第22與23天，分別在0、2、4、6、8、10和12h采集瘤胃液測(cè)定pH、VFA和生物胺含量，第24天屠宰采

12、集瘤胃靜脈血、盲腸靜脈血、瘤胃液和盲腸內(nèi)容物，分測(cè)生物胺和VFA含量。結(jié)果顯示，與低精料相比，飼喂高精料日糧的山羊瘤胃液中的酪胺、腐胺、組胺、甲胺、色胺、TVFA、乙酸、丁酸、戊酸和總支鏈脂肪酸顯著性增加(P＜0.05)，而pH和乙丙比顯著性降低（P＜0.05）;同時(shí)瘤胃液、瘤胃靜脈血、盲腸內(nèi)容物和盲腸靜脈的生物胺含量顯著提高;飼喂高精料日糧的山羊盲腸內(nèi)容物中的總支鏈VFA、乙酸和丙酸濃度與低精料相比顯著性增加（P＜0.05），總VFA