日糧模式對瘤胃與后腸中生物胺生成的影響.pdf

1、瘤胃液中生物胺主要是由相關瘤胃微生物產生的酶，或飼料原料中固有的酶，催化瘤胃液中游離氨基酸脫羧基生成。近年的研究表明，當反芻動物飼喂高精料日糧時，其日糧中可發(fā)酵碳水化合物和可降解蛋白會在瘤胃中微生物的作用下快速降解產生VFA和乳酸等酸性介質，從而破壞瘤胃正常的酸堿平衡，使瘤胃pH下降和屏障功能的破壞，進而使一些原來不容易通過瘤胃上皮的機體異常代謝物質相對較容易的通過上皮屏障進入血液，進而對動物機體產生危害。另外，精料快速發(fā)酵產生的酸性介

2、質會改變瘤胃內的微生物區(qū)系，使產生生物胺的微生物菌群數量增加，進而使瘤胃液中生物胺含量增加，而瘤胃上皮屏障的受損，可能會使進入血液中的生物胺的含量增加，為充分了解日糧精料對瘤胃及血液中生物胺含量的影響，為奶牛的科學飼喂提供理論依據。本論文首先建立了高效液相色譜法測定瘤胃液和血液中生物胺的方法，再通過普查試驗測定了飼喂高精料奶牛血液中的生物胺含量。然后，比較了飼喂不同精粗比日糧的奶牛瘤胃發(fā)酵參數、產奶性能、瘤胃中產生生物胺細菌數量、采食量

3、、以及瘤胃液、血液和糞中的生物胺含量的差異，以研究高精料日糧對瘤胃代謝、瘤胃上皮完整性和動物生產性能的影響。最后，我們通過測定飼喂不同精粗比日糧山羊瘤胃液、瘤胃靜脈血、盲腸內容物和盲腸靜脈血中生物胺含量的改變，以研究瘤胃上皮和盲腸上皮的完整性、以及生物胺吸收的腸道區(qū)段。
　　 1.反相高效液相色譜法測定瘤胃液中的生物胺
　　 應用反相高效液相色譜法，建立了瘤胃液中5種生物胺的測定方法。樣品經0.5mol/L鹽酸提取后，用

4、丹磺酰氯柱前衍生，流動相為乙腈和0.1 mol/L乙酸銨溶液，采用梯度洗脫，流速為1.0 mL/min，紫外檢測器波長254 nm，柱溫30℃。結果表明，采用該方法，色胺、腐胺、甲胺、組胺、酪胺五種生物胺能在40 min內得到良好分離，回收率在88.46％-98.49％之間，相對標準偏差小于10％。應用上述方法，研究了高精料和低精料日糧條件下瘤胃液中5種生物胺濃度的差異。結果表明，在高精料日糧條件下，飼喂前山羊瘤胃液中的酪胺和甲胺濃度顯

5、著高于低精料日糧(P＜0.05)，但在組胺、色胺和腐胺濃度方面，二者未有顯著性差異(P＜0.05)。結果顯示，該方法可用于瘤胃液中的生物胺的分析，且飼喂前山羊瘤胃液中的酪胺和甲胺濃度受日糧精粗比值的影響。
　　 2.西崗、長豐和上海牧場奶牛靜脈血中生物胺濃度及其與產奶量、乳成分及糞中VFA濃度的相關性研究
　　 為闡明我國當前主要飼養(yǎng)模式下奶牛血液中生物胺的含量及其與產奶量間的相關性。本試驗選取，西崗、長豐和上海三個飼喂

6、精粗比分別是65∶35、70∶30和60∶40的牛場，分別采用頸靜脈采集血液，同時收集糞便，采用高效液相色譜法測定其生物胺的含量，采用氣相色譜法測定了揮發(fā)性脂肪酸的含量，同時針對生物胺與產奶量及VFA之間的相關性進行分析。試驗結果表明，生產奶牛血液中存在一定濃度的生物胺;而相關性分析結果表明，奶牛血液中生物胺含量與產奶量、乳蛋白及乳脂率之間均不存在顯著相關（P＞0.05）;除長豐和上海牧場糞便中的總VFA和乙酸，及長豐與西崗和上海的戊酸

7、濃度差異顯著(P＜0.05)外，其它VFA在不同牧場間并不存在顯著性差異(P＞0.05），同時總揮發(fā)性脂肪酸及其組成與血液中生物胺量之間并不呈顯著相關（P＞0.05）。結果顯示，在中國當前奶牛飼養(yǎng)模式下，奶牛血液中存在一定濃度的酪胺、腐胺、組胺、甲胺和色胺，其可能影響動物健康。
　　 3.高精料日糧對奶牛瘤胃發(fā)酵及瘤胃液、外周血液和糞中生物胺含量的影響
　　 為研究飼喂高精料日糧條件下奶牛瘤胃液、外周血液和糞中生物胺含量

8、和產生生物胺的微生物數量的改變，以及瘤胃發(fā)酵參數、瘤胃液pH與瘤胃液、血液和糞中生物胺含量的關系，試驗選取4頭初產(泌乳60-140d)的健康荷斯坦奶牛，采用2×2交叉試驗設計。試驗期為21d，包括:11d的適應期和10d的采樣期。試驗日糧為含40％（低精料組;對照組）和70％（高精料組）精料的日糧。在采樣期的第1、4、6和10d采集瘤胃液用來測定pH、VFA、NH3-N、乳酸和生物胺的含量;另外在采樣期的第1、4、6和10d的上午采食

9、前15min和采食后4和8h通過尾靜脈采血，測定生物胺含量;在采樣期的第1、4、6和10d的飼喂前15min采集糞樣，測定糞樣中生物胺含量。結果顯示，飼喂高精料顯著提高了奶牛瘤胃液中乳酸、總VFA、丁酸、戊酸和總支鏈VFA的含量，同時乙丙比顯著降低，但未能顯著降低乙酸和NH3-N水平;同時，與飼喂低精料相比，飼喂高精料的奶牛的糞中和瘤胃液中的生物胺含量呈顯著增加(P＜0.05)，同時外周血液中生物胺含量亦顯著增加(P＜0.05)。相關性

10、分析結果表明:瘤胃液pH與瘤胃液、血液中生物胺含量，以及糞pH與糞中生物胺含量呈顯著負相關（P＜0.05），但瘤胃液pH和糞中生物胺含量無顯著相關（P＞0.05）。高精料日糧顯著提高了瘤胃液中的乳酸菌數量（P＜0.05），但對牛鏈球菌數量無顯著影響（P＞0.05）。結果表明:飼喂高精料能促進消化道內生物胺的生成與轉移，提高乳酸菌數量。然而，有關生物胺和生物胺生成菌在動物生理活動中的作用，特別是在炎癥應答中的作用，尚需進一步研究。

11、　　 4.高精料日糧對山羊瘤胃、瘤胃靜脈、盲腸與盲腸靜脈中生物胺濃度的影響研究
　　 為研究高精料日糧對瘤胃液和瘤胃靜脈血、盲腸內容物和盲腸靜脈血中生物胺含量的影響，同時探討二者的相關性。本研究以山羊為模型動物，實驗選用6頭裝有永久性瘺管的本地閹割山羊，采用隨機區(qū)組試驗設計，每組隨機選取3只山羊，實驗期為24天。在試驗期第22與23天，分別在0、2、4、6、8、10和12h采集瘤胃液測定pH、VFA和生物胺含量，第24天屠宰采

12、集瘤胃靜脈血、盲腸靜脈血、瘤胃液和盲腸內容物，分測生物胺和VFA含量。結果顯示，與低精料相比，飼喂高精料日糧的山羊瘤胃液中的酪胺、腐胺、組胺、甲胺、色胺、TVFA、乙酸、丁酸、戊酸和總支鏈脂肪酸顯著性增加(P＜0.05)，而pH和乙丙比顯著性降低（P＜0.05）;同時瘤胃液、瘤胃靜脈血、盲腸內容物和盲腸靜脈的生物胺含量顯著提高;飼喂高精料日糧的山羊盲腸內容物中的總支鏈VFA、乙酸和丙酸濃度與低精料相比顯著性增加（P＜0.05），總VFA