海南霉素對(duì)瘤胃發(fā)酵模式、甲烷生成和微生物區(qū)系的影響.pdf

1、本試驗(yàn)采用體外人工瘤胃發(fā)酵法研究日糧中添加不同水平的海南霉素對(duì)瘤胃發(fā)酵參數(shù)、甲烷生成、微生物區(qū)系和多樣性變化的影響。旨在探討海南霉素這一離子載體型抗生素是否可有效調(diào)控甲烷氣體的生成、改變瘤胃發(fā)酵的類型以及對(duì)瘤胃微生物區(qū)系的影響。
　　 結(jié)果表明,日糧中添加海南霉素顯著降低了瘤胃發(fā)酵的產(chǎn)氣量(P＜0.05),在體外發(fā)酵的各個(gè)時(shí)間點(diǎn),海南霉素的不同添加水平以及莫能菌素組的產(chǎn)氣量都顯著低于對(duì)照組(P＜0.05),且10mg/kg試驗(yàn)組

2、的產(chǎn)氣量顯著低于其它水平(P＜0.05)。在體外發(fā)酵的24h時(shí)間點(diǎn),瘤胃發(fā)酵的產(chǎn)氣量隨海南霉素添加量的增加呈二次曲線規(guī)律下降(P＜0.05)。由此可以表明,海南霉素可以抑制產(chǎn)氣微生物的活性,且10mg/kg對(duì)產(chǎn)氣量的抑制作用明顯。
　　 海南霉素的添加降低了甲烷的產(chǎn)量(P＜0.05),并隨其添加量的增加呈明顯的二次曲線規(guī)律下降(P＜0.05),同時(shí)隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加,海南霉素對(duì)甲烷生成的抑制作用逐漸增強(qiáng)。當(dāng)海南霉素的添加水平為7

3、.2mg/kg時(shí),其對(duì)甲烷的抑制能力最強(qiáng)。
　　 在體外發(fā)酵的過(guò)程中,海南霉素的各試驗(yàn)組以及莫能菌素組的pH值都顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),說(shuō)明海南霉素可以提高瘤胃液中的pH值。在體外發(fā)酵的24h時(shí)間點(diǎn),隨著添加水平的增加,瘤胃pH值呈顯著的線性升高趨勢(shì)(P＜0.05),與對(duì)照組相比,10mg/kg的海南霉素可將pH值提高了4個(gè)百分點(diǎn)。
　　 日糧中添加海南霉素顯著降低了氨態(tài)氮的濃度(P＜0.05)。在24h發(fā)酵時(shí)間

4、點(diǎn),瘤胃氨態(tài)氮的濃度隨海南霉素添加水平的提高呈二次曲線規(guī)律下降(P＜0.05),各試驗(yàn)組比對(duì)照組氨氮濃度分別減少了6.45％、12.03％、12.21％。
　　 海南霉素的各試驗(yàn)組對(duì)瘤胃液中的總揮發(fā)性脂肪酸的影響不顯著(P＞0.05)。而乙、丁酸的摩爾比例及乙酸/丙酸值呈顯著的下降趨勢(shì)(P＜0.05),丙酸的摩爾比例增加(P＜0.05)。海南霉素可以降低體外瘤胃發(fā)酵過(guò)程中乙酸的含量,提高丙酸的濃度,從而改變了瘤胃的發(fā)酵類型。

5、r>　　 在日糧中添加不同水平的海南霉素,顯著影響了發(fā)酵液中黃色瘤胃球菌,真菌及原蟲(chóng)的相對(duì)于總菌(16SrDNA)的數(shù)量(P＜0.05),其中黃色瘤胃球菌以及真菌的數(shù)量隨海南霉素添加量的提高呈二次曲線規(guī)律降低(P＜0.05),而原蟲(chóng)的數(shù)量呈顯著的線性降低(P＜0.05)。而對(duì)于白色瘤胃球菌以及甲烷菌來(lái)說(shuō),海南霉素的添加水平對(duì)其影響均不顯著(P＞0.05)。
　　 日糧中添加海南霉素使細(xì)菌的種群及特異性發(fā)生了很大的變化。隨著培養(yǎng)

6、時(shí)間的延長(zhǎng)樣品DGGE圖譜的條帶數(shù)存在一定變化,條帶6在海南霉素試驗(yàn)組與對(duì)照組中一直存在。添加海南霉素后,條帶5代表的細(xì)菌處于優(yōu)勢(shì)位置。條帶4代表的菌種經(jīng)體外培養(yǎng),對(duì)照組在16h后消失,海南霉素組在12h后則處于優(yōu)勢(shì)位置。在體外培養(yǎng)的12h時(shí)間點(diǎn)以后.條帶3代表的菌種消失,而對(duì)照組中該細(xì)菌未消失。同時(shí)條帶1與條帶2在培養(yǎng)12h后則失去優(yōu)勢(shì)位置。
　　 對(duì)回收測(cè)序的優(yōu)勢(shì)條帶比對(duì)分析后發(fā)現(xiàn),其中條帶1代表的菌在基因庫(kù)中比對(duì),其屬于亨

7、氏丁酸弧菌屬(Butyrivibriohungatei)。條帶2、4、5代表的菌種屬于未培養(yǎng)細(xì)菌(Unculturedrumenbacterium)。條帶6代表菌為嗜淀粉瘤胃桿菌(Ruminobacteramylophilus),海南霉素的添加使條帶3代表的細(xì)菌受到抑制,條帶3代表的菌在基因庫(kù)中登錄為溶纖維丁酸弧菌(B.fibrisolvens)。
　　 由DGGE圖譜的相似性分析可知,發(fā)酵各時(shí)間點(diǎn)瘤胃液樣品的微生物區(qū)系相似性指