水稻類病變突變體spl5的誘發(fā)機制與蛋白組學分析.pdf

1、植物類病變突變體(lesion mimic mutant)是指一類在沒有逆境、損傷或病害情況下就能自發(fā)形成類似病原物侵染的壞死斑(lesion)的突變體。許多類病變突變體表現出與植物防衛(wèi)過程的HR非常相似，常常伴隨活性氧的積累及其它抗病相關的生理、分子應答反應。水稻類病變突變體spl5對多個稻瘟病小種和白葉枯病菌日本小種增強了抗性。通過對spl5突變體不同壞死程度葉片組織的活性氧含量及其清除酶活性測定，發(fā)現在spl5葉片壞死斑形成過程中

2、，O2-和H2O2的含量均比對照高，在spl5中活性氧顯著積累，表現出HR的早期特征“氧迸發(fā)”現象;活性氧清除酶SOD、POD、APX和CAT的酶活力也顯著性變化。APX、POD的活性會隨著O2-和H2O2的含量的升高而相應的提高，但CAT的活性卻有所下降，SOD活性只在spl5葉片壞死較多的部位比在野生型中的活性高。表明spl5中活性氧代謝的平衡失調可能是誘發(fā)HR原因之一。利用蛋白雙向電泳技術對spl5突變體與野生型對照進行蛋白組分析

3、，共分離得到了2000多個蛋白點，通過軟件比對分析和MALDI-TOF-TOF質譜分析，鑒定了14個差異表達的蛋白，涉及pre-mRNA剪接、氨基酸代謝、光合作用、糖酵解、ROS代謝、防御相關、其他蛋白等多個功能。通過RT-PCR，我們分析了這14個基因的表達情況，結果表明轉錄水平與蛋白水平的變化大部分基本一致，其中抗壞血酸過氧化物酶APX7、谷胱甘肽S轉移酶GSTF14、3-磷酸甘油醛脫氫酶(G3 PDH)與細胞壞死有關，S-腺苷甲硫