家蠶綿繭突變體差異蛋白組學(xué)分析及黃血抑制基因I的精細(xì)定位.pdf

1、家蠶吐絲結(jié)繭對(duì)于自身的生存以及防御天敵都起到了極其重要的作用,同時(shí)繭絲能夠?yàn)槿藗兯?并在絲綢業(yè)、商貿(mào)業(yè)、農(nóng)業(yè)、及文化交流中都發(fā)揮了重要的作用。蠶繭由繭衣、繭層、蛹體及蛻皮四部分構(gòu)成,繭層可用于生產(chǎn)繅絲,蠶繭的外觀形狀是區(qū)分品種的主要標(biāo)志之一,一般因種而異。在不斷的進(jìn)化歷程中,家蠶積累了大量突變體及突變系,其中與蠶繭性狀相關(guān)的突變體主要有:綿繭、絲膠繭、外層黃繭、綠繭、薄紙繭等,這些突變體是研究繭質(zhì)性狀的重要材料。本論文將主要介紹在探

2、索繭絲形成、營(yíng)繭行為和繭絲著色機(jī)理相關(guān)基礎(chǔ)信息方面的工作,具體來(lái)說(shuō)包括以下內(nèi)容:
　　(1)以結(jié)繭性狀具有明顯差異的正常繭、綿繭、絲膠繭3個(gè)家蠶品系個(gè)體為材料,利用雙向電泳圖譜分析技術(shù),對(duì)其5齡第3天和第6天幼蟲(chóng)中部絲腺各區(qū)段的蛋白質(zhì)樣品分別進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)在三個(gè)家蠶品系同一時(shí)期中部絲腺同一區(qū)段細(xì)胞蛋白質(zhì)中均可檢測(cè)到一定數(shù)量的特異蛋白斑點(diǎn)。選取一些顯著差異蛋白斑點(diǎn)進(jìn)行基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定分析,得到35個(gè)可信蛋白質(zhì)鑒定

3、結(jié)果,利用蛋白質(zhì)相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù),查詢并分析蛋白相關(guān)的功能,這些差異的蛋白質(zhì)包括參與能量代謝、蛋白質(zhì)合成等生物學(xué)過(guò)程的功能蛋白,其中發(fā)現(xiàn)絲氨酸蛋白酶抑制劑16(serpinl6)和絲氨酸蛋白酶抑制劑18(serpinl8)可能與家蠶綿繭突變形成相關(guān),這部分實(shí)驗(yàn)對(duì)于家蠶繭絲品質(zhì)形成機(jī)理的研究具有重要參考價(jià)值。
　　(2)以中系品種KY(黃血黃繭)基因型為:YY+I+I,和歐系品種Ba(白血白繭),為歐一化,基因型為:+Y+Y II,為材料

4、組配F1代及BC1回交群體,(Ba×KY)×KY和KY×(Ba×KY)分別記作BC1F和BC1M。在本實(shí)驗(yàn)室先前初步定位的基礎(chǔ)上,共篩選出5個(gè)SSR標(biāo)記和1個(gè)STS標(biāo)記共6個(gè)多態(tài)性標(biāo)記與I基因連鎖,利用BC1M群體構(gòu)建I基因遺傳連鎖圖,連鎖圖的圖距為12.8cM,將I基因定位于S001和STS48-1標(biāo)記之間,與I基因最近的標(biāo)記為STS48-1,遺傳距離為0.5cM。最終候選區(qū)域縮小至300kb左右,此區(qū)間有4個(gè)預(yù)測(cè)基因,目前正對(duì)其預(yù)測(cè)