側(cè)耳屬栽培菌株遺傳多樣性及其附生菌對生態(tài)因子響應(yīng).pdf

1、側(cè)耳屬真菌種類繁多，與人類關(guān)系密切，是一種具有較高營養(yǎng)價值、重要經(jīng)濟(jì)價值和藥用價值的食用、藥用真菌，但菌種市場一直比較混亂，菌種管理相對滯后，同物異名或同種異物較多，不僅給生產(chǎn)環(huán)節(jié)帶來不便，也給食用菌的科學(xué)研究和學(xué)術(shù)交流造成障礙。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，一些新的方法和技術(shù)不斷出現(xiàn)，本研究利用LSUrDNA序列、ITS序列、SSR分子標(biāo)記相結(jié)合的方式對側(cè)耳屬主要栽培菌株進(jìn)行鑒定和遺傳多樣性分析，為該屬真菌的生產(chǎn)利用與科學(xué)研究提供參考，有利

2、于其種質(zhì)資源的保護(hù)。
　　 采用PCR產(chǎn)物直接測序獲得側(cè)耳屬54個菌株的ITS序列和核糖體DNA大亞基(LSUrDNA)序列，于GenBank中側(cè)耳屬的6個生物學(xué)種相關(guān)序列比對，得到除2個白靈側(cè)耳(Pleurotusnebrodensis)菌株外的52個菌株與6個生物學(xué)種的系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果表明：與ITS序列分析相比，LSUrDNA序列進(jìn)行側(cè)耳屬物種的鑒定更方便、穩(wěn)定、可靠。52個栽培的側(cè)耳屬菌株被分為兩個種，即糙皮側(cè)耳(Pleu

3、rotusostreatus)與肺形側(cè)耳(Pleurotuspulmonarius)。
　　 通過AFLP快速富集重復(fù)序列的方法構(gòu)建側(cè)耳屬基因組微衛(wèi)星富集文庫，根據(jù)分離的微衛(wèi)星DNA序列設(shè)計引物，結(jié)果篩選出18個多態(tài)性微衛(wèi)星標(biāo)記，共產(chǎn)生396個條帶，建立系統(tǒng)發(fā)育樹并進(jìn)行遺傳多樣性分析，開發(fā)出側(cè)耳屬菌株鑒定和遺傳分析的技術(shù)。結(jié)果表明：每對引物檢測等位基因4-32個，SSR引物的PIC介于0.35到0.94，UPGMA方法聚類分析表

4、明：供試材料間遺傳相似系數(shù)變幅為0.755到0.9995，在80％的相似系數(shù)上，54個菌株分為3大類，包括糙皮側(cè)耳、肺形側(cè)耳和白靈側(cè)耳。該結(jié)果和ITS與LSUrDNA序列鑒定一致。在系統(tǒng)發(fā)育樹中同一個種不同菌株聚為同一個分支，為鑒定其種類，借助于出菇實(shí)驗(yàn)、拮抗實(shí)驗(yàn)和ISSR分子標(biāo)記等方法，表明ACCC50618、ACCC50866和ACCC50915為同物異名菌株；ACCC50249與ACCC50476為同物異名菌株，其結(jié)果與SSR分析