珊瑚共附生可培養(yǎng)真菌菌群多樣性及其生物活性研究.pdf

1、本文從廣東徐聞珊瑚礁國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)采集8種珊瑚,用培養(yǎng)法分離純化真菌,應(yīng)用形態(tài)學(xué)觀察與分子鑒定相結(jié)合的方法,進(jìn)行珊瑚共附生真菌菌群多樣性研究,并對(duì)分離的真菌菌株進(jìn)行生物活性篩選。
　　 運(yùn)用稀釋平板法和基于internal transcribed spacer-rDNA(ITS-rDNA)基因序列的系統(tǒng)發(fā)育分析對(duì)珊瑚共附生可培養(yǎng)真菌多樣性進(jìn)行研究,將所得到的基因序列與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)GenBank的序列進(jìn)行相似性比較并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)

2、育樹(shù)。實(shí)驗(yàn)中從8種珊瑚表面和內(nèi)部共分離得到97株菌落形態(tài)各異的真菌。ITS-rDNA序列分析及形態(tài)學(xué)鑒定表明,珊瑚共附生真菌主要包括曲霉菌Aspergillus sp.、枝孢霉菌Cladosporium sp.、炭角菌Xylariales sp.、青霉菌Penicillium sp.、葡萄穗霉菌Stachvbotrys sp.、赤霉菌Gibberella moniliformis、鐮刀霉菌Fusarium sp.等。分離得到的菌株中,4

3、-13與GenBank中已報(bào)道的基因序列的相似性?xún)H為89％,可能是潛在的新屬種。
　　 選取04叢生盔形珊瑚(Galaxea fascicularis)共附生可培養(yǎng)真菌進(jìn)行抑菌活性和酶抑制活性篩選。采用96孔板培養(yǎng)法結(jié)合酶標(biāo)儀測(cè)定。以6種常見(jiàn)的致病菌或致食品腐敗的細(xì)菌為指示菌,對(duì)其共附生真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行抗菌活性篩選,對(duì)抗菌能力及抗菌譜進(jìn)行研究。結(jié)果表明:19株真菌均具有不同程度的抗菌活性。高活性菌株占52.63％,其中4-4

4、、4-5兩菌株表現(xiàn)出良好的抗菌活性。在酶抑制性實(shí)驗(yàn)中,有10株真菌對(duì)一種或兩種酶具有抑制活性,其中曲霉屬真菌效果良好,散囊屬真菌4-12、枝孢霉4—20對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制效果超過(guò)了陽(yáng)性對(duì)照石杉?jí)A甲。粗提物樣品對(duì)α-葡萄糖苷酶、乙酰膽堿酯酶有較好的抑制活性,說(shuō)明具有抗老年癡呆、抗高血壓活性。這對(duì)新藥的研究開(kāi)發(fā)提供了一定的理論基礎(chǔ),具有進(jìn)一步的研究?jī)r(jià)值。
　　 結(jié)果表明,珊瑚共附生可培養(yǎng)真菌多樣性較為豐富,潛在新的微生物菌種資源,