抗稻瘟病基因Pigm共分離的分子標記研究及雜交材料的分析.pdf

1、稻瘟病是由子囊菌Magnaporthegrisea(}tebert)Barr引起的，該病廣泛分布于世界水稻種植區(qū)域，是對水稻生產最具毀滅性的病害之一。實踐證明，利用分子標記與傳統(tǒng)雜交育種相結合將單個或多個抗病基因轉移到高產優(yōu)質水稻中是防治稻瘟病經濟、有效和安全的措施。
　　 水稻稻瘟病主效顯性基因Pigm為廣譜抗性基因，其抗譜明顯強于廣譜抗性基因Pi1、Pi2、Pi3、Pi9等，在抗病育種中具有更高的應用價值。本研究利用Pigm

2、的供體親本谷梅4號、95個水稻親本及一些雜交材料，開發(fā)與Pigm共分離的分子標記，對加速抗源篩選，抗病基因的鑒定和分子標記輔助育種具有重大意義。另外，本研究試圖分析Pigm與Pita在聚合后的純合體材料中各自的表達量。主要研究結果如下：
　　 (1)根據(jù)Pigm定位標記在互聯(lián)網上查找它們在水稻物理圖譜上的位置，在它們所在的區(qū)域附近找到22個已定位于該區(qū)段的SSR標記。在22個SSR標記中，僅有RM276和RM3724兩個標記在谷

3、梅4號和多個親本間具有多態(tài)性。RM3724較RM276與Pigm距離較近，因此利用RM3724在谷梅4號和95個親本間檢測多態(tài)性，結果表明，僅有R527、R624共2個親本材料與谷梅四號具有多態(tài)性。且RM3724進行MAS選擇的準確率僅為80％，表明RM3724為非共分離的分子標記。
　　 (2)根據(jù)谷梅4測序的結果以及秈稻9311的shot-gun序列、粳稻日本晴AP005659序列和Pigm等位的同源性很高的Pi2序列比對的

4、結果，根據(jù)插入缺失區(qū)域序列總共設計了40對InDe1引物，其中結合S29742、S1408、S2997、S2723這4對引物可以將谷梅4號和其它95個親本完全分開。利用這些InDel標記對谷梅4號的雜交組合的F2群體進行分子輔助選擇，并結合田間的抗性表現(xiàn)來判斷MAS選擇的準確性。分子檢測和田間鑒定的結果均表明，標記S29742、S1408、S2997、S2723分子檢測的結果和田間抗性鑒定的結果是完全一致的，MAS選擇的效率高達100％