苜蓿葉象甲的致病白僵菌篩選及其致病力測定.pdf

1、新疆苜蓿種植業(yè)集約化和規(guī)?；难杆侔l(fā)展,使苜蓿種植結(jié)構(gòu)逐漸單一,蟲災(zāi)頻繁發(fā)生,害蟲暴發(fā)成為苜蓿生產(chǎn)的主要障礙之一。本文通過篩選、誘變的方法獲得高致病力的白僵菌菌株,測定其對苜蓿葉象甲及苜蓿籽象甲和苜蓿根瘤象甲成蟲的致病力,研究了白僵菌菌株生物學(xué)特性以及與化學(xué)殺蟲劑的相容性,探討了如何提高白僵菌殺蟲效果以及適宜田間應(yīng)用的條件,為白僵菌的生產(chǎn)應(yīng)用和苜蓿害蟲的生物防治提供理論依據(jù)。本論文主要得到以下結(jié)果:
　　1.經(jīng)10個白僵菌菌株對苜

2、蓿葉象甲3齡幼蟲的致病力測定,初步篩選出致病力較高Bb01和Bb04兩個白僵菌菌株。再將兩個菌株稀釋成×105、×106、×107、×108、×109個孢子/mL的濃度梯度,對苜蓿葉象甲3齡幼蟲進(jìn)行致病力測定,在處理后15d,Bb01和Bb04的致病力最好,LC50分別為3.19×106個孢子/mL和8.3×106個孢子/mL。
　　2.通過對白僵菌菌株Bb01和Bb04的核糖體DNA-ITS-PCR獲得的序列登陸ncbi進(jìn)行BL

3、AST比對,鑒定Bb01和Bb04均為球孢白僵菌。
　　3.從預(yù)先篩選出的白僵菌菌株Bb01出發(fā),采用紫外誘變的方法選出產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶最高的兩個菌株Bb-10-12和Bb-30-14,將這兩個菌株與野生型菌株Bb01分別稀釋成×105、×106、×107、×108、×109個孢子/mL的濃度梯度,室內(nèi)測定它們對苜蓿葉象甲3齡幼蟲的致病力,結(jié)果在處理9d后,Bb-10-12、Bb-30-14菌株及野生型對3齡幼蟲的校正死亡率分別為10

4、0.00％、77.78%和62.97%,3個菌株之間的致病力存在極顯著差異性。從而進(jìn)一步篩選出更高致病力的白僵菌菌株Bb-10-12。對Bb01和Bb-10-12生物學(xué)特性的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),PSA培養(yǎng)基比較適合供試菌株的生長和產(chǎn)孢;溫度為25℃時孢子萌發(fā)率最高,相對濕度高于75%利于孢子萌發(fā),紫外線對孢子萌發(fā)有抑制作用。
　　4.菌株Bb-10-12對苜蓿葉象甲2齡、4齡和成蟲的室內(nèi)致病力測定結(jié)果表明,濃度為1.65×108個孢子/mL

5、對2齡、4齡和成蟲的LT50分別為7.73d、9.10d、27.48d。溫、濕度對菌株的致病力有影響,在溫度為25℃,在相對濕度高于95%條件下白僵菌對苜蓿葉象甲成蟲的致病力明顯高于相對濕度低于85%的條件。
　　5.Bb-10-12田間控制苜蓿葉象甲的試驗(yàn)顯示,蟲生真菌田間防效都在50%以下。在與5種化學(xué)殺蟲劑的相容性試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),吡蟲啉對菌落生長抑制率最低,濃度(1.0×)對Bb01和Bb-10-12的菌落的抑制率分別為6.49

6、%和7.41%;對誘變型菌株Bb-10-12的孢子萌發(fā)抑制率最低的為氯蟲苯甲酰胺,最高濃度(1.0×)萌發(fā)抑制率為16.94%;對野生型菌株Bb01孢子萌發(fā)抑制率最小的為氯氟氰菊酯,最高濃度(1.0×)萌發(fā)抑制率為22.04%。
　　6.菌株Bb-10-12對苜蓿根瘤象甲和苜蓿籽象甲成蟲的致病力測定結(jié)果表明,Bb-10-12對苜蓿根瘤象甲具有較高致病力,處理后12d,對苜蓿根瘤象甲的LC50為4.4536×104個孢子/mL;球孢