松材線蟲(chóng)病發(fā)病植株細(xì)菌的分離鑒定及綠僵菌Mf2菌株殺線測(cè)定.pdf

1、松材線蟲(chóng)病(Pinewoodnematodedisease,PWND)是國(guó)際上公認(rèn)的重要性檢疫病害,是松樹(shù)上的一種毀滅性病害。目前人們對(duì)其病原以及致病機(jī)理做了大量研究,但仍沒(méi)有確切定論。本研究擬通過(guò)分析松材線蟲(chóng)病感病植株與健康植株間微生物區(qū)系的差別,為揭示其致病機(jī)理尋找一個(gè)新的突破口。另外,探索測(cè)定了綠僵菌Mf2菌株對(duì)松材線蟲(chóng)的毒力,為利用綠僵菌作為生物農(nóng)藥防治松材線蟲(chóng)打下了基礎(chǔ)。
　　 本研究以野外健康的和自然感病不足一個(gè)月的

2、15年生馬尾松為材料,利用組織分離法分離細(xì)菌,實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:1、LB平板培養(yǎng)基培養(yǎng)組織塊1d后,感病植株木塊出現(xiàn)大量細(xì)菌,而健康植株未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌。2、挑取細(xì)菌純化培養(yǎng),共獲得12株菌株。提取細(xì)菌基因組DNA,利用分子鑒定的方法鑒定結(jié)果為杓蘭果膠桿菌(Pectobacteriumcypripedii)、阿氏腸桿菌(Enterobacterasburiae)、腸桿菌屬(Enterobacter.sp.)。
　　 金龜子綠僵菌Metarh

3、iziumanisopliae的寄主范圍比較廣,是當(dāng)前研究和應(yīng)用最多的蟲(chóng)生真菌之一。本研究從四種常見(jiàn)培養(yǎng)基PDA、PPDA、SDAY、SMAY中選擇一種最適于綠僵菌Mf2菌株?duì)I養(yǎng)生長(zhǎng)及產(chǎn)孢的培養(yǎng)基,測(cè)定了該菌株對(duì)松材線蟲(chóng)的毒殺活性。結(jié)果表明,Mf2菌株在PPDA培養(yǎng)基中生長(zhǎng)速度最快,14d后菌落直徑高于其他三種培養(yǎng)基,為76.00mm;培養(yǎng)14d后PPDA培養(yǎng)基中菌株產(chǎn)孢量最高,為5.667×1010個(gè)孢子,顯著高于其他培養(yǎng)基上的產(chǎn)孢量