兔皮膚病原真菌的分離鑒定及常用消毒劑的篩選.pdf

1、皮膚真菌病是由一類嗜角質(zhì)絲狀真菌引起的皮膚、毛發(fā)感染的傳染性皮膚病。病原菌主要是毛癬菌屬(Trichophyton)、小孢子菌屬(Microsporum)和表皮癬菌屬(Epidermophyton)。兔皮膚真菌?。―ermatophytosis）是一種傳染性極強的人畜共患接觸性皮膚病。本病主要侵害兔皮毛，出現(xiàn)皮屑增多、結(jié)痂、脫毛、滲出、毛囊炎及癢感等癥狀，嚴(yán)重的可引起兔營養(yǎng)不良、生長遲緩、飼料報酬降低等，甚至影響兔毛的產(chǎn)量和品質(zhì)，降低種

2、兔的生產(chǎn)性能和仔兔的成活率，給養(yǎng)兔業(yè)生產(chǎn)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。兔皮膚真菌病可以通過多種途徑傳染人，皮膚真菌引起的感染已成為危害畜牧養(yǎng)殖業(yè)及社會公共衛(wèi)生的一大難題。因此，建立對兔皮膚真菌病病原的快速分離及分類鑒定方法，以及選擇有效的兔舍環(huán)境消毒藥物，不但對兔養(yǎng)殖非常重要，而且具有重要的公共衛(wèi)生意義。
　　 本研究通過采集患皮膚真菌病兔的皮屑、毛發(fā)和結(jié)痂等病料，進行病原分離培養(yǎng)，分離出可疑致病菌。通過顯微鏡觀察真菌形態(tài)學(xué)進行初步鑒定，

3、然后采用真菌ITS區(qū)通用引物對分離到的病原菌ITS區(qū)進行PCR擴增并測序，將其ITS區(qū)序列在GenBank中進行比對分析，確定病原真菌的生物學(xué)分類，最后對其親緣關(guān)系進行系統(tǒng)發(fā)育分析。經(jīng)形態(tài)學(xué)初步鑒定，分離得到的病原真菌為小孢子菌屬；序列比對和系統(tǒng)發(fā)育分析表明，該菌與Microsporum gypseum strain WCH-MG001（序列號：GU348990.1）的ITS序列具有99％的同源性，在系統(tǒng)發(fā)育樹上也屬于同一分支，從而確定

4、從病兔采集的病原菌為石膏樣小孢子菌。
　　 通過藥敏實驗，篩選對該皮膚病原真菌敏感的環(huán)境消毒劑及相應(yīng)的有效濃度，即癸甲溴銨（1:400,1:600）、苯扎溴銨（1:400,1:600）、甲酚皂（1:10,1:20）、復(fù)合碘（1:1200）4種兔場常用環(huán)境消毒劑，篩選出的三種消毒劑以不同濃度對同一兔場不同兔舍進行環(huán)境消毒，分別為：1號舍用癸甲溴銨（1:400,1:600）、2號舍用苯扎溴銨（1:400,1:600）、3號舍用甲酚皂

5、（1:10,1:20），檢測消毒前后兔舍內(nèi)空氣真菌氣溶膠和地面及籠舍表面真菌濃度，對比3種消毒劑的消毒效果。檢測結(jié)果經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)分析表明，癸甲溴銨1:400時對空氣、地面及籠舍表面真菌的消毒效果較好，消毒后1h效果最好，見效快，持續(xù)時間長，在3種消毒劑中最好;在1:600時對空氣和表面真菌的消毒效果好，見效快，但對地面消毒6h后效果不明顯，持續(xù)時間較短。苯扎溴銨在1:400和1:600時對空氣消毒效果明顯，但持續(xù)時間短，對表面的消毒效果較

6、好，消毒后1h效果最明顯，但對地面消毒6h后效果都不明顯。甲酚皂1:10和1:20時空氣消毒效果較好，但見效較慢，1:10濃度時在消毒后3h效果最明顯。對表面消毒效果在消毒后1h效果較好，對地面消毒后3h效果不明顯，對墻壁和籠具在消毒后6h效果不明顯，持續(xù)時間較短。綜合分析得知，三種消毒劑對空氣的消毒效果都好于地面及籠舍表面消毒效果；癸甲溴銨1:400時對空氣、地面及籠舍表面真菌的消毒效果最好，消毒后1h效果最好，見效快，持續(xù)時間達到6