抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆體系的優(yōu)化.pdf

1、大豆是人類重要的植物蛋白和植物油的來源，而目前中國大豆生產(chǎn)能力低下,因此通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)改善大豆品質(zhì)、提高大豆產(chǎn)量是必要的YC1、YC2草劑的轉(zhuǎn)基因大豆具有提高產(chǎn)量的巨大潛力，因而廣泛種植。通過轉(zhuǎn)基因手段來提高大豆的產(chǎn)量，當(dāng)務(wù)之急是建立高效的大豆轉(zhuǎn)化體系。
　　 本研究運用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)化方法，探討了包括大豆基因型、種子發(fā)芽方式、共培養(yǎng)條件、農(nóng)桿菌侵染條件在內(nèi)的對大豆轉(zhuǎn)基因效率有重要影響的多個因素。通過19個大豆品種再生

2、率和芽伸長率的比較，發(fā)現(xiàn)YC1、YC2是最好的受體品種；通過3種發(fā)芽方式的比較，發(fā)現(xiàn)種子發(fā)芽一天和用水浸泡一天是最好的發(fā)芽方式；優(yōu)化共培養(yǎng)體系時發(fā)現(xiàn)，25mg/L的α-硫辛酸能有效提高報告基因的瞬時表達率，而光照條件和外植體的擺放方式也會影響轉(zhuǎn)基因效率。另外，實驗結(jié)果表明，農(nóng)桿菌侵染時間的長短和農(nóng)桿菌的濃度對外植體的轉(zhuǎn)化效率沒有影響。
　　 通過以上工作，我們把大豆的轉(zhuǎn)基因效率從0.2％提高到3％-4％以上。該研究對大豆的基礎(chǔ)研