蠶蛹蟲草發(fā)酵物的飼料添加劑制備及藥理研究.pdf

1、中藥作為飼料添加劑的主要目的是通過增強抗應激反應、抗氧化能力以及提高動物體的免疫力等功能以達到預防和治療疾病的作用。蠶蛹及其培養(yǎng)的蛹蟲草是一種高蛋白、多元素的營養(yǎng)物質(zhì)，但由于多種原因?qū)е缕淠壳吧形创笠?guī)模的開發(fā)利用。大量文獻報道，蠶蛹和蛹蟲草具有提高動物和人體的免疫功能以及抗氧化、抗應激等多種功效。本研究擬用干蠶蛹培養(yǎng)蛹蟲草得到的發(fā)酵物為實驗材料，以化學性氧化應激損傷和免疫損傷小鼠為單胃哺乳動物模型，對蠶蛹蟲草發(fā)酵物作為單胃哺乳動物飼料添

2、加劑的可行性進行探討。
　　 本研究通過觀察蠶蛹蟲草菌絲體在平板培養(yǎng)基上的長勢和長滿培養(yǎng)基的時間，篩選得到最佳菌株（CM2），其培養(yǎng)基菌絲體萌發(fā)最早，2d即可見白色新生菌絲；菌落直徑增長速度快，菌絲體濃密，長滿培養(yǎng)皿的時間短，只需 14.6d。通過固體發(fā)酵培養(yǎng)后（培養(yǎng)基組成，干蠶蛹:玉米粉:培養(yǎng)液（蔗糖20g/l，蛋白胨5g/l，復合維生素0.04g/l，KH2PO41g/l，MgSO40.5g/l）=4:1:10）），蠶蛹蟲草

3、發(fā)酵物中主要營養(yǎng)物質(zhì)含量為：粗蛋白：49.24％，粗脂肪：20.18％，粗多糖：10.27％。
　　 通過研究蠶蛹蟲草發(fā)酵物（CFSP）對正常小鼠體重、抗氧化及免疫功能的影響，探討蠶蛹蟲草發(fā)酵物作為單胃哺乳動物飼料添加劑的可行性，方法如下：將ICR小鼠隨機分為對照組、CFSP添加劑高、中、低劑量組（6％、3％、1％），自由攝食飲水，每日稱重，飼養(yǎng)14天，觀察小鼠體重變化。試驗結(jié)束后，檢測小鼠免疫器官胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)；測定小鼠血

4、清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活性及丙二醛（MDA）含量。實驗結(jié)果表明，與普通飼料小鼠比較，各劑量CFSP添加劑具有促進小鼠體重增長的作用，提高小鼠免疫器官胸腺和脾臟指數(shù)，但因飼養(yǎng)周期較短，尚未達到統(tǒng)計顯著性差異；血清ALT、AST活性及MDA含量與普通飼料組小鼠同樣無顯著性差異。
　　 選擇四氯化碳致化學性氧化應激損傷小鼠為動物模型對蠶蛹蟲草菌絲體水提物（WECM）作為單胃哺乳動物飼料添加劑的保健功效進行研究；將

5、ICR小鼠隨機分為正常組、模型組和 WECM高、低劑量組（0.4、0.2g/kg）。除正常組外其余各組腹腔注射四氯化碳造模，給藥 21天后測定小鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活性及谷胱甘肽（GSH)和白介素2（IL2）、腫瘤壞死因子a（TNFa）、g干擾素（IFNg）的含量變化及小鼠肝組織超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量變化。實驗結(jié)果表明，WECM能顯著提高四氯化碳致化學性應激損傷模型小鼠血清中GSH

6、含量和肝組織超氧化物歧化酶SOD活力，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量，提高機體抗氧化能力；提高血清中免疫因子IL2和IFNg水平，降低TNFa水平，提高機體免疫力。
　　 選擇氫化可的松致免疫損傷模型小鼠為對象，以發(fā)酵物提取的蠶蛹蟲草粗多糖（CMPS）為實驗材料，進一步對蠶蛹蟲草發(fā)酵物作為單胃哺乳動物飼料添加劑的活性成分進行探討；試驗方法如下：將ICR小鼠隨機分為正常組、模型組和CMPS高、低劑量組（0.4、0.2g/kg）。除正

7、常組外各組隔日皮下注射氫化可的松（25mg·kg 1·d 1）5次造模，給藥結(jié)束后測定小鼠血清谷胱甘肽（GSH）和白介素2（IL2）、腫瘤壞死因子a（TNFa）、g干擾素（IFNg）的水平變化及小鼠肝組織（SOD）活力大小、丙二醛（MDA）含量變化。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CMPS 可顯著提高模型小鼠血清GSH 含量和肝組織中超氧化物歧化酶SOD活力，降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量，提高機體抗氧化能力；提高血清中細胞因子IL2和IFNg水平，降低T