小麥赤霉病菌對多菌靈的抗藥性及致病性缺陷菌株的回復突變檢測.pdf

1、由鐮刀菌引起的赤霉病是危害多種糧食作物的一種重要病害，廣泛分布于世界溫暖潮濕地區(qū)。赤霉病不僅造成產量損失，而且產生的真菌毒素嚴重威脅人畜健康。在我國，禾谷鐮刀菌(Fusarium graminearum Schwabe)是小麥赤霉病的主要致病菌種，其有性階段為玉蜀黍赤霉菌(Gibberella zeae)。近年來，華東地區(qū)的小麥赤霉病菌已經對多菌靈產生了抗藥性，增加了小麥赤霉病防治的難度。為進一步了解國內其它地區(qū)的小麥赤霉對多菌靈的抗藥

2、性情況，我們從黑龍江、吉林和河南等8個省市采集了小麥赤霉病55個樣本進行多菌靈敏感性實驗。并對小麥赤霉病菌致病缺陷性突變菌株進行了回復突變檢測，建立了一套回復突變檢測體系。 1．小麥赤霉病菌對多菌靈的抗藥性從黑龍江、吉林、上海、河南、陜西、北京、湖北和四川等不同地區(qū)的小麥病穗上單孢分離得到55株小麥赤霉病菌菌株。對55株小麥赤霉病菌中31株代表菌株的保守基因EF-1-alpha基因PCR擴增并測序的結果顯示，除兩株從吉林地區(qū)分離

3、出來的菌株是F. acuminatum外，其余29株均為禾谷鐮刀菌(F. graminearum)。應用菌絲生長速率法測定各菌株對多菌靈的抗藥水平，結果發(fā)現(xiàn)：所測不同菌株對多菌靈的抗性水平同屬敏感型，但菌株間有一定差異，EC<,50>值在0．3241～2．1055μg/mL之間，產孢量在菌株間有顯著差異。以上結果說明黑龍江、吉林、河南和湖北等地田間采集的小麥赤霉病菌樣本在離體培養(yǎng)條件下均對多菌靈敏感，這個結論給多菌靈使用的安全性提供了一

4、定的理論依據(jù)。 2．小麥赤霉病菌致病力缺陷菌株的回復突變本試驗是在美國普爾度大學植物與植物病理系許景榮博士課題組已構建的小麥赤霉病菌FSIT7基因缺失突變菌株(fst7)的基礎上進行的，已初步確定FST7基因與小麥赤霉病菌致病過程相關。為進一步了解小麥赤霉病菌FST7基因的功能，本試驗利用PEG/原生質體介導的方法將野生型FST7基因成功導入突變菌株(fst7)，構建了回復突變菌株，并通過PCR方法驗證了其基因型。經過3代以上的