蒼耳(Xanthium sibiricum)蛋白質(zhì)和多糖的分離.pdf

1、蒼耳（Xanthium sibiricum Patr.）為菊科蒼耳屬（Xanthium）一年生草本植物，其體內(nèi)含有豐富的抗病活性物質(zhì)，對(duì)病原菌、農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)、病毒具有很好的防治效果。為進(jìn)一步發(fā)掘野生植物資源蒼耳的利用價(jià)值，本論文從蒼耳蛋白質(zhì)和多糖的分離方面研究了影響蒼耳種子蛋白質(zhì)分離的幾種因素、干種子蛋白質(zhì)層析行為分析及各蛋白組分的生物活性測(cè)定；研究了蒼耳幼苗多糖的分離，測(cè)定了對(duì)煙草花葉病毒的抑制作用及對(duì)煙草體內(nèi)幾種防御酶活性的影響。主要研

2、究結(jié)果如下：
　　 1、論文研究了蒼耳種子蛋白質(zhì)層析行為的影響因素。結(jié)果表明，鹽析與非鹽析蛋白的層析行為結(jié)果差異明顯；不同飽和度硫酸銨鹽析蛋白的層析行為表明不同飽和度的硫酸銨鹽析蛋白含量和組成成分不同；干種子和鮮種子材料對(duì)種子蛋白質(zhì)的層析行為分析表明干種子層析后各組分蛋白質(zhì)含量處于較高水平，利于獲得蛋白質(zhì)。
　　 2、采用離子交換層析和凝膠層析對(duì)蒼耳干種子蛋白質(zhì)組分進(jìn)行了初步分離。干種子蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)CM-Sepharose

3、 Fast Flow交換柱，洗脫出2個(gè)峰，活性測(cè)定顯示兩個(gè)峰具有抗TMV活性；經(jīng)過(guò)DEAE-Sepharose FastFlow交換柱，洗脫出2個(gè)主峰，測(cè)定了各峰蛋白組分的抗 TMV活性。采用Sephadex G-75層析柱對(duì)離子交換層析的蛋白又進(jìn)一步分離，各峰獨(dú)立，峰形尖銳，無(wú)拖尾現(xiàn)象，層析效果好。
　　 3、蒼耳幼苗多糖提取采用水浸提、乙醇沉淀的方法：80℃高溫水提，經(jīng)過(guò)Sevage法多次去蛋白、醇沉淀；所得脫蛋白粗多糖呈黃

4、褐色，色素含量較高；多糖含量為11％～26％。
　　 4、采用半葉法檢測(cè)幼苗粗多糖對(duì)煙草花葉病毒的抑制作用：結(jié)果表明，30％醇沉多糖抑制效果較好，在0.125～1.0㎎/mL的濃度范圍內(nèi)，其抑制效果隨多糖濃度的提高而提高，在多糖終濃度為1.0㎎/mL時(shí)，在心葉煙上對(duì)TMV的抑制率達(dá)到48.36％；60％、80％醇沉多糖抑制效果較低。
　　 5、測(cè)定了蒼耳多糖處理普通煙后煙草葉片中過(guò)氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）