芋艿蛋白質(zhì)的分離及表征.pdf

1、本文以芋艿為原料，通過優(yōu)化工藝條件得到芋艿分離蛋白制備的最佳工藝參數(shù)，并依據(jù)Osborne分級分離方法，進一步分離得到芋艿清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白四種蛋白組分，在此基礎(chǔ)上對芋艿分離蛋白的理化性質(zhì)及分級分離所得四種蛋白組分的分子特性進行了表征。
　　1.芋艿分離蛋白的最佳提取工藝條件為：浸提體系pH值為10.00，溫度40℃，液料比6mL/g，酸沉pH值為4.90，此工藝條件下制備的芋艿分離蛋白得率為1.33±0.020％，

2、純度為84.67±0.011%。
　　2. IEF電泳分析表明芋艿分離蛋白的pI主要集中在6.73和5.21兩個條帶。SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn)芋艿分離蛋白主要由四種亞基組成，其相對分子質(zhì)量分布分別在57000、46300、34200和8500Da左右，添加巰基乙醇可打開二硫鍵增加相對分子質(zhì)量在23100Da左右的新條帶。DSC分析證實芋艿分離蛋白的變性溫度為71.3±0.2℃，變性焓ΔH為1.550J/g。流變分析表明pH值及Na

3、Cl、KCl、CaCl2、MgCl2濃度對芋艿分離蛋白的變性、聚集有明顯的影響。
　　3.根據(jù)Osborne方法，分級分離得到清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白四種芋艿蛋白組分，相對含量分別為43.38%、3.97%、2.99%和38.27%；pI分別是5.04、5.23、6.67和6.76。SDS-PAGE分析表明，清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的相對分子量分布分別位于57900、38000、32900-58400、21700-

4、54800Da之間。DSC分析證實清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白及谷蛋白的變性溫度分別是67.1℃、70.1℃、71.9℃和71.2℃，變性焓ΔH分別是1.434J/g、1.455J/g、1.470J/g和1.551J/g。四種蛋白組分的氨基酸種類較為齊全，必需氨基酸含量豐富。
　　4.二級結(jié)構(gòu)分析顯示，清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白分子結(jié)構(gòu)差異明顯。四種蛋白組分在酰胺I區(qū)均含有大量的β片層、少量α螺旋及無規(guī)卷曲結(jié)構(gòu)。除α螺旋二級結(jié)構(gòu)