2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、自1988年P(guān)ayne L等發(fā)現(xiàn)ALV-J以來(lái),幾乎在全世界的白羽肉雞群中發(fā)現(xiàn)了此病。近十年來(lái),蛋雞品系中也出現(xiàn)ALV-J的感染,且地方品系雞中ALV-J的感染也頻見(jiàn)報(bào)道。而且,ALV-J發(fā)病出現(xiàn)了新的特點(diǎn),一:發(fā)病日齡提前,感染范圍增大;二:發(fā)病形式更是多種多樣,同時(shí)出現(xiàn)了多種病毒的混合感染的現(xiàn)象,給防治帶來(lái)的新的難題;三:血管瘤型ALV-J的出現(xiàn),除導(dǎo)致髓細(xì)胞瘤的發(fā)生外,病雞在外表皮膚、關(guān)節(jié)、毛囊或內(nèi)臟等出現(xiàn)血泡或血洞,病雞常因大量

2、失血而死亡。
   本文為了解山東地區(qū)蛋雞禽白血?。ˋvian Leukosis,AL)流行情況,從泰安、臨沂、青島、聊城等4個(gè)地區(qū)的祖代種雞及其相應(yīng)的父母代、商品代雞場(chǎng)無(wú)菌采集1 827份血清(祖代雞血清597份、父母代雞血清710份、商品代雞血清520份)和1 209份泄殖腔棉拭子(祖代雞棉拭子597份、父母代雞棉拭子460份、商品代雞棉拭子152份)。通過(guò)ELISA試劑盒進(jìn)行了ALV-J、ALV-AB抗體檢測(cè)及P27抗原檢

3、測(cè)。檢測(cè)結(jié)果顯示,山東地區(qū)祖代種雞未檢測(cè)到ALV-J抗體,ALV-AB抗體檢出率極低,僅為0.84%,但個(gè)別祖代雞場(chǎng)P27抗原的陽(yáng)性率較高,可能主要與不規(guī)范雜交擴(kuò)繁導(dǎo)致內(nèi)源性病毒感染有關(guān),也不能排除免疫耐受感染因素;父母代種雞ALV-J抗體水平均較高,明顯高于ALV-AB抗體陽(yáng)性水平,P27抗原的陽(yáng)性率也有所升高;商品蛋雞ALV-J及ALV-AB抗體水平明顯高于父母代水平,但P27抗原陽(yáng)性率未見(jiàn)明顯增加。
   本研究在上述某商

4、品代蛋雞場(chǎng)采血時(shí)發(fā)現(xiàn)疑似血管瘤型病雞,并且在其父母代及祖代雞群中也發(fā)現(xiàn)疑似ALV病雞。通過(guò)PCR、IFA及ELISA檢測(cè)方法,從該具有血緣關(guān)系的祖代、父母代及商品代雞中分離到共6株ALV-J,其中祖代、父母代中各分離到1株病毒,分別命名為SDDP1001株和SDDP1002株;商品代蛋雞中分離到4株病毒,分別命名為SDDP1003株、SDDP1004株、SDDP1005株、SDDP1006株,在國(guó)內(nèi)尚屬首次。根據(jù)ALV-J原型毒株HPR

5、S103設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物,擴(kuò)增gp85基因,并與各亞群參考毒株序列核苷酸進(jìn)行同源性分析,結(jié)果顯示:分離自商品代蛋雞的SDDP1003株、SDDP1004株、SDDP1006株和父母代分離株SDDP1002位于同一分支,同源性在97.2%-97.9%之間,與HPRS103株同源性94.7%-95.2%;SDDP1005與祖代分離株SDDP1001株在同一分支,與HPRS103株同源性為98.3%,4株分離自商品代的ALV-J同源性為95

6、.0%-99.9%;6株病毒與A亞群代表株RAV-1A和B亞群代表株RAV-2 B的同源性僅在12.0%-12.8%之間,與E亞群代表株ev-1 E同源性為12.2%-12.4%之間。選取三株代表病毒(SDDP1001株、SDDP1002株和SDDP1006株)進(jìn)行病毒的毒價(jià)及復(fù)制動(dòng)力學(xué)特性分析,結(jié)果表明:分離自祖代的病毒株滴度最高,為105.59 TCID50/0.1ml,而父母代SDDP1002株和商品代SDDP1006株病毒滴度相

7、近,分別為104.61 TCID50/0.1ml和104.71 TCID50/0.1ml,三株病毒具有相似的復(fù)制動(dòng)力學(xué)曲線。等量三株病毒分別感染DF-1細(xì)胞,檢測(cè)結(jié)果表明,等量病毒感染細(xì)胞后在相同時(shí)間內(nèi)祖代SDDP1001株病毒上清中含有更高的感染性病毒。病毒分離結(jié)合ELISA(或者IFA)的檢測(cè)方法是ALV-J感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”,但是費(fèi)時(shí)費(fèi)力,而且 ELSIA檢測(cè)試劑盒價(jià)格昂貴,不適用于雞場(chǎng)進(jìn)行大規(guī)模檢測(cè)。此外,由于ALV-J感染細(xì)胞后

8、不產(chǎn)生細(xì)胞病變,不能通過(guò)組織半數(shù)感染量對(duì)病毒進(jìn)行定量。因此,為了更好進(jìn)行臨床樣品的檢測(cè)和實(shí)驗(yàn)室研究,需要建立一種快捷、簡(jiǎn)便、靈敏,并且能夠的定量的ALV-J檢測(cè)方法。本研究中針對(duì)pol基因和env基因結(jié)合處保守區(qū)域設(shè)計(jì)了一對(duì)特異性引物和一條探針,建立了TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法,通過(guò)對(duì)熒光定量PCR的反應(yīng)體系和反應(yīng)條件的摸索優(yōu)化,使得其在101~1010copy/μl具有良好的線性關(guān)系。同時(shí)進(jìn)行了重復(fù)性、特異性、敏感性試驗(yàn),結(jié)果

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