刺參養(yǎng)殖池塘異養(yǎng)菌數量變動及區(qū)系組成的初步研究.pdf

1、刺參(Apostichopus japonicus)不含膽固醇，其體內有豐富的生理活性物質，具有極高的營養(yǎng)價值。自2002年以來，刺參養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速，2005年全國海參養(yǎng)殖面積達到7.4萬公頃，產量達到6.5萬噸，產值接近80億元，其中山東的產量占88％以上，成為我國北方海水養(yǎng)殖的重要的特色支柱產業(yè)。但是，該產業(yè)在迅速發(fā)展的同時，一些嚴重的問題也逐漸顯現出來，如養(yǎng)殖環(huán)境惡化、產品品質下降、養(yǎng)殖病害嚴重等。 微生物是生態(tài)系統(tǒng)的重要

2、組成部分，在養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)的物質循環(huán)和能量流動中發(fā)揮著巨大作用。它既是生產者能，利用光能或簡單的無機物生產有機物質，構建細胞，又是消費者、分解者和儲存者，是生態(tài)系統(tǒng)中物質循環(huán)和能量轉換的主要推動者。因此，無論是從刺參養(yǎng)殖技術的提高考慮，還是從刺參養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展考慮，研究刺參養(yǎng)殖池塘微生物生態(tài)都具有比較重要意義。 本文以刺參養(yǎng)殖池塘作為研究對象，研究了池塘水體、底泥、附著基以及刺參腸道中可培養(yǎng)細菌數量及區(qū)系組成的周年變動情況。獲

3、得的主要結果如下： 1不投餌池塘環(huán)境和海參腸道中異養(yǎng)菌數量變動及區(qū)系組成研究 從2007年6月到2008年5月，對威海市榮成不投餌刺參養(yǎng)殖池塘內養(yǎng)殖環(huán)境中和刺參腸道中的異養(yǎng)菌總活菌數周年變化進行了調查，并分析了異養(yǎng)菌的區(qū)系組成。研究結果表明： 不投餌池塘餌池塘水中總活菌數現出春季到夏季升高，秋冬兩季下降的規(guī)律，水中總活菌數的數量變動春季在(0.3±0.1)×104～(0.5±0.1)×104cfu mL-1之間；

4、夏季變動在(0.4±0.2)×104～(0.8±0.0)×104cfu mL-1之間；秋季變動在(0.5±0.3)×104～(2.1±1.4)×104cfu mL-1之間變化；冬季變動在(0.3±0.2)×104～(0.5±0.1)×104cfu mLk-1之間：在底泥中總活菌數在夏季和秋季(7、8、10月)數量較高，而在冬季和初春數量開始下降。這與水中總活菌數的變動趨勢相似，底泥中總活菌數的數量春季變動在(4.3±0.01)×104c

5、fu g-1～(2.7±0.2)×105 cfu g-1之間；夏季變動在(2.7±0.7)×105 cfu g-1～(4.0±1.0)×105 cfu g-1之間；秋季變動在(4.3±1.1)×105 cfu g-1～(4.4±0.1)×105 cfu g-1之間變化；冬季變動在(7.1±1.3)×104 cfu g-1～(1.9±0.4)×105cfu g-1之間；在附著基上總活菌數量隨季節(jié)變化有所不同，附著基上的活菌總數在冬季(10

6、月至1月)較高，而在春季和夏季較低。附著基上總活菌數春季變動在(1.6±0.2)×104～(1.7±0.3)×105cfu g-1之間；夏季變動在(6.4±2.3)×104～(3.3±1.2)×105cfu g-1之間；秋季變動在(5.3±2.0)×105～(6.0±1.9)×105cfu g-1之間變化；冬季變動在(1.2±0.4)×106～(1.4±0.2)×107cfu g-1之間。 從刺參養(yǎng)殖池塘水體中分離出7個屬，其中

7、假單胞菌(Pseudomonas)、氣單胞菌(Aeromonas)和弧菌Vibrio)是主要的優(yōu)勢菌；從底泥中分離出16個屬，其中優(yōu)勢菌是芽孢桿菌(Bacillus)，其次是黃桿菌(Flavobacterium)和黃單胞菌(Xanthomonas)。 刺參腸道內總活菌數量隨季節(jié)的變化與水體和底泥有所不同，而與附著基上總活菌數的變化趨勢相似。刺參腸道內總活菌數在春夏兩季(3、5、6和7月份)較低，秋冬兩季(8、10、11和1月份)

8、則顯著升高。刺參腸道內總活菌數變化在(5.9±0.58)×104～(2.9±1.4)×107cfu·g-1之間。其中，春季變動在(5.9±0.58)×104cfu·g-1～(2.1±0.41)×105 cfu·g-1之間；夏季變動在(5.2±3.5)×104～(2.6±1.4)×105cfu·g-1之間；秋季變動在(2.0±2.0)×107～(2.9±1.4)×107 cfu·g-1之間變化；冬季變動在(9.2±2.1)×106～(2.

9、6±0.8)×107 cfu·g-1之間。 從2007年6月到2008年5月，對青島市膠南投餌刺參養(yǎng)殖池塘內環(huán)境中和刺參腸道內的異養(yǎng)菌總活菌數周年變化進行了調查，并分析了其區(qū)系組成。研究結果表明，在投餌池塘中水中總活菌數在夏季(6月至7月)數量最高，秋季數量開始下降，到冬季有所回升在11月份達到第二個高峰。水體中總活菌數的數量春季變動在(2.0±0.3)×105～(2.2±0.2)×105 cfu mL-1之間；夏季變動在(1.

10、0±0.3)×105～(7.1±2.5)×105cfu mL-1之間；秋季變動在(3.2±0.8)×105～(1.1±0.1)×106cfumL-1之間；冬季變動在(2.9±1.3)×105～(3.0±0.7)×105cfu mL-1之間。底泥中總活菌數在夏季(8月)最高，之后開始下降，在冬季和春季保持在較低的水平。底泥中總活菌數的數量變動春季變動在(2.0±0.3)×105cfu g-1～(2.2±0.2)×105 cfug-1之間；

11、夏季變動在(1.0±0.3)×105 cfu g-1～(7.1±2.5)×105cfu g-1之間；秋季變動在(3.2±0.8)×105～(1.1±0.1)×106cfu g-1之間；冬季變動在(2.9±1.3)×105～(3.0±0.7)×105cfu g-1之間。 刺參腸道內活菌的數量隨季節(jié)變化有所不同，在春夏季(3、5、6和7月份)較低，秋冬季(8、10、11和1月份)則顯著升高。腸道內異養(yǎng)菌總活菌數變動在(1.8±0.8

12、)×104～(1.1±1.2)×107cfu·g-1之間。其中，春季變動在(2.31±0.43)×105cfu·g-1～(2.53±0.84)×105 cfu·g-1之間；夏季變動在(1.8±0.8)×104～(5.0±0.63)×105 cfu·g-1之間；秋季變動在(1.0±0.1)×106～(1.1±1.2)×107 cfu·g-1之間；冬季變動在(7.0±2.2)×105-(7.2±4.5)×106cfu·g-1之間。利用生理生

13、化方法和16srDNA測序對分離到的138株細菌進行了鑒定，結果表明這些細菌分別屬于13個屬，優(yōu)勢菌分別為弧菌(Vibrio)、假單胞菌(Pseudomonas)和芽孢桿菌(Bacillus)。其中，弧菌占39.2％，假單胞菌占15.9％，芽孢桿菌占13.2％。弧菌在秋、冬兩季較少出現，所占比例從春、夏兩季的35％～62％減少到秋、冬兩季的25％～28％。而假單胞菌在春、夏、秋三季占總株數的比例都不超過14％，但在冬季上升到38％。

14、 3不同類型附著基對剌參養(yǎng)殖池塘環(huán)境及刺參腸道中異養(yǎng)菌數量變動及組成影響的研究 從2007年6月到2008年5月，利用池塘網圍研究了不同類型附著基對池塘環(huán)境中異養(yǎng)菌總活菌數周年變化進行了調查，并分析了其區(qū)系組成。結果表明，水體中異養(yǎng)菌總活菌數在6-10月份之間較高，之后開始迅速下降，冬季(11和1月份)一直維持很低的數量，到春季(3-4月份)其數量再次回升。水體中總活菌數春季在(0.4±0.1)×104～(0.5±0.1)×

15、104 cfu mL-1之間變化，夏季在(0.2±0.01)×104～(0.8±0.1)×104 cfu mL-1之間變化，秋季在(0.9±0.1)×104～(1.8±0.2)×104 cfu mL-1之間變化，冬季在(0.1±0.1)×104～(0.3±0.1)×104 cfu mL-1之間變化。不同網圍底泥中的總活菌數變化趨勢總體和水體中總活菌數的變化趨勢類似。不同類型附著基對網圍內底泥總活菌數影響較大。總體而言，以瓦片和塑料管為附

16、著基的網圍底泥中的細菌總數較高，其中，以瓦片作附著基的網圍內底泥細菌總數顯著高于其它網圍。不同類型附著基上細菌數量的變化隨時間不同有所差異，在附著基剛放入水體不久時，附著基上細菌數量相對較少，而當年10和11月份附著基上數量則達到最大，到次年1月份以后，其數量又有所下降，直到春季開始再次回升。 刺參腸道內總活菌數隨季節(jié)的變化有所不同，不同附著基網圍刺參都呈現出相似趨勢?？偦罹鷶翟诖杭竞颓锛据^高，夏季和冬季刺參腸道中的總活菌數顯著

17、低于其它季節(jié)。在總活菌數較高的季節(jié)(8月至11月，3月到5月)，石塊附著基網圍中刺參腸道內細菌的數量要少于其它網圍中的刺參，而塑料管、空心磚和水泥管附著基網圍中的刺參腸道內細菌數量較高。利用16srDNA測序和生理生化技術對從刺參腸道中分離得到的細菌進行了鑒定。從總體上看，刺參腸道內的優(yōu)勢菌是假單胞菌、弧菌和芽孢桿菌，其中，弧菌和假單胞菌在春季和夏季所占比例較高，芽孢桿菌比例在秋季至冬季顯著上升。但在秋季和冬季，這三種優(yōu)勢菌的總數所占比