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文檔簡介
1、近年來許多起調(diào)控作用的小分子RNA被發(fā)現(xiàn),真核生物的基因表達(dá)中,miRNA起著非常關(guān)鍵的調(diào)控作用.在胚胎發(fā)生過程中,許多參與組織特異性的miRNA功能已被證明,但關(guān)于miRNA在胚胎性別分化階段作用的研究尚未見報(bào)道。雞胚作為研究脊椎動(dòng)物胚胎發(fā)育生物學(xué)經(jīng)典的模型,運(yùn)用已有幾十年的歷史。但相比其它的脊椎動(dòng)物,對于家雞中的miRNA數(shù)量、種類和表達(dá)譜我們?nèi)灾跎?,尤其是胚胎期的性別分化階段。 本研究通過對性別分化前后時(shí)期家雞胚胎樣品
2、(4天齡雌、雄和7天齡雌、雄)的小RNA純化,反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增建立cDNA文庫,利用Solexa/ Illumina高通量測序方法對其測序,根據(jù)目前已公布的miRNA注釋信息對所得小RNA序列注釋分類,并從已知miRNA及其前體的序列的保守性和結(jié)構(gòu)特點(diǎn),以生物信息學(xué)方法從中篩選、甄別可信度高的miRNA。隨后我們統(tǒng)計(jì)miRNA的表達(dá)量,構(gòu)建表達(dá)譜并進(jìn)行顯著差異表達(dá)分析。最終得到miR-148a,h005-5p,h014-5p,miR—2
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