雞胸腺發(fā)育形態(tài)學研究.pdf

1、胸腺(thymus)為中樞淋巴器官，它是T細胞發(fā)育、分化和成熟的場所。骨髓中產(chǎn)生的T祖細胞在多種趨化因子的作用下進入胸腺，在胸腺微環(huán)境內(nèi)發(fā)育分化為成熟的T細胞，進入外周血和淋巴器官中，成為機體健康的衛(wèi)士。但動物胸腺存在增齡性萎縮(退化)，功能減退現(xiàn)象，機體也隨之衰老，疾病叢生。本課題通過研究不同日齡雞胸腺形態(tài)結構變化、神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡調(diào)節(jié)因子分布變化規(guī)律來探討胸腺發(fā)育和萎縮的機理，主要研究內(nèi)容和結果如下：
　　 1雞胸腺組

2、織學結構的增齡性變化規(guī)律
　　 為研究不同日齡雞胸腺結構增齡性特點，了解雞胸腺萎縮的可能機制，本課題采用HE和PAS染色技術對不同日齡雞胸腺切片進行染色，并測定其形態(tài)學指標。結果顯示，胸腺表層的被膜伸入到實質(zhì)內(nèi)，將其分成許多不完整的胸腺小葉。實質(zhì)由皮質(zhì)和髓質(zhì)構成，表層皮質(zhì)著色較深，內(nèi)側髓質(zhì)染色較淺。皮質(zhì)主要由淋巴細胞和少量上皮細胞構成，髓質(zhì)主要由上皮細胞和少量淋巴細胞構成，內(nèi)含典型的胸腺小體結構。隨著日齡增加，皮質(zhì)變薄，皮、髓質(zhì)

3、面積比例逐漸減??；髓質(zhì)部血管豐度逐漸遞增；典型胸腺小體能夠分泌多糖的活性，且總數(shù)有緩慢遞增趨勢，21日齡達峰值，35日齡后緩慢遞減；其中鈣化小體不具有分泌多糖的活性，隨增齡其數(shù)量有顯著遞增。這一研究表明，隨著胸腺的發(fā)育和衰老，骨髓中的始祖T細胞遷移至胸腺的能力以及分化的能力均下降，同時伴有胸腺細胞數(shù)量及其生活動區(qū)域減少，即皮質(zhì)區(qū)域進行性縮小，胸腺萎縮；由于衰老引起的T淋巴細胞減少不能滿足機體的需求，從而可能導致血管代償性的增多，也有可能

4、是中雞胸腺產(chǎn)生了大量死亡胸腺細胞胸腺血管要靠自身數(shù)量的增多才足以運輸和清理增齡過程產(chǎn)生的大量死亡細胞，或者，胸腺萎縮使得單位范圍內(nèi)毛細血管豐度增加；具有多糖分泌活性的胸腺小體功能下降，可能從另一個側面為胸腺小體與胸腺的衰老有關提供了證據(jù)。
　　 2神經(jīng)遞質(zhì)5-HT在雞胸腺內(nèi)的增齡性變化規(guī)律
　　 為研究相關神經(jīng)遞質(zhì)(5-HT)在雞胸腺內(nèi)的分布及表達變化規(guī)律，本課題采用免疫組織化學SABC法對不同日齡階段的AA肉雞胸腺進行

5、5-HT陽性細胞形態(tài)學觀察。結果顯示，各日齡雞胸腺都含有5-HT陽性物質(zhì)，主要分布于胸腺髓質(zhì)以及皮、髓質(zhì)交界區(qū)。5-HT陽性細胞大多圍繞血管壁或靠近血管呈簇分布，也有少量陽性細胞的散在分布。陽性細胞具有形態(tài)多樣性，大多呈圓形或卵圓形，還存在一些明顯的絲狀或束狀形態(tài)。另外，典型胸腺小體呈5-HT陽性反應，而在鈣化胸腺小體中5-HT則緊緊圍繞其外周分布。5-HT陽性產(chǎn)物在雞胸腺中的表達強度隨日齡增長有遞增趨勢。這一研究表明，5-HT陽性細胞

6、在雞胸腺髓質(zhì)內(nèi)的優(yōu)勢分布提示5-HT可能參與胸腺T細胞的分化成熟，調(diào)節(jié)胸腺供血量；隨日齡增長，5-HT表達強度呈遞增趨勢，而胸腺的發(fā)育在此過程中經(jīng)歷了增長和萎縮，提示胸腺的發(fā)育情況與5-HT的表達強弱有關，低表達能促進胸腺生長，而高表達則抑制胸腺生長并最終導致胸腺萎縮，即5-HT對胸腺的發(fā)育有免疫促進和抑制雙重作用。
　　 3TLR4在雞胸腺內(nèi)的增齡性變化規(guī)律
　　 為研究相關免疫因子TLR4在不同日齡階段雞胸腺內(nèi)的分布

7、及表達變化，探討免疫因子對胸腺影響的可能性機制，本課題采用免疫組織化學SABC法對不同日齡階段的AA肉雞胸腺進行TLR4陽性細胞形態(tài)學觀察。結果顯示，TLR4的陽性表達產(chǎn)物見于雞胸腺發(fā)育的早期階段，且陽性較強，120日齡雞胸腺中表達非常微弱。TLR4陽性產(chǎn)物主要分布于胸腺皮質(zhì)、髓質(zhì)交界區(qū)，靠近髓質(zhì)的一側，形成一個典型的環(huán)狀。在髓質(zhì)中，這些陽性細胞在胸腺小體和血管近附近呈簇分布，也有少量陽性細胞的散在分布。TLR4陽性細胞具有形態(tài)多樣性。