奶山羊乳腺發(fā)育的形態(tài)學(xué)研究.pdf

1、乳腺是一個具有重要經(jīng)濟(jì)價值的器官，其生長發(fā)育和泌乳生理功能密切相關(guān)。目前，世界上僅有少數(shù)實(shí)驗(yàn)室致力于乳腺基礎(chǔ)研究。盡管有關(guān)哺乳動物乳腺發(fā)育和泌乳機(jī)制的研究開展地很早，但對于乳腺基礎(chǔ)研究，尤其是奶山羊乳腺不同發(fā)育時期的相關(guān)形態(tài)學(xué)研究甚少。本研究應(yīng)用激光掃描共聚焦顯微技術(shù)、透射電鏡技術(shù)、組織化學(xué)相關(guān)方法和Real-timePCR系統(tǒng)研究關(guān)中奶山羊乳腺組織發(fā)育不同時期的顯微和超微結(jié)構(gòu)改變，以及乳腺主要組織成分的變化情況，為進(jìn)一步研究奶山羊乳腺

2、的發(fā)育及功能提供翔實(shí)的形態(tài)學(xué)資料。 本研究采用HE染色和透射電鏡超薄切片法系統(tǒng)研究奶山羊乳腺組織胚后發(fā)育過程的顯微和超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明：奶山羊乳腺發(fā)育是一個連續(xù)的過程，分為青春期、妊娠期、泌乳期和退化期四個階段，其發(fā)育過程中的形態(tài)學(xué)、組織學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)上的變化與其他反芻動物基本類似，與嚙齒類動物存在一定差異。為了在表達(dá)和轉(zhuǎn)錄兩個水平上系統(tǒng)闡述奶山羊乳腺中糖類、脂類和蛋白質(zhì)的變化規(guī)律，分別應(yīng)用過碘酸-Schiff、油紅O、茚三酮-

3、Schiff染色法檢測奶山羊乳腺、并用直接免疫熒光法顯示乳腺中β-酪蛋白的變化，同時對奶山羊乳腺發(fā)育中相關(guān)基因的表達(dá)變化做了相對定量分析。結(jié)果表明：(1)青春期、妊娠初中期和退化期乳腺中的糖類以糖蛋白和蛋白聚糖為主，妊娠晚期和泌乳期以乳糖為主。此外，乳糖合成關(guān)鍵酶-β.1，4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶的表達(dá)與乳糖表達(dá)變化趨勢基本一致，即在青春期和妊娠初期低水平表達(dá)，妊娠中期后逐漸增加，到泌乳期達(dá)到最高，退化期迅速下降，逐漸恢復(fù)到青春期的水平；(2

4、)青春期乳腺主要為富含三酰甘油的脂肪組織，脂代謝關(guān)鍵酶-乙酰輔酶A羧化酶(ACACA)和激素敏感脂肪酶(HSL)表達(dá)水平很高，表明此時脂代謝非常旺盛。妊娠期和泌乳期，乳腺上皮細(xì)胞逐漸呈現(xiàn)分泌特性，乳汁的生成需要乳脂大量合成，導(dǎo)致ACACA在妊娠期后持續(xù)升高，至泌乳中晚期達(dá)到頂峰，此外大脂肪細(xì)胞逐漸消失，腺泡上皮細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量脂滴。HSL進(jìn)入妊娠期后表達(dá)水平迅速下降，并在整個泌乳期持續(xù)低水平表達(dá)，既在一定程度上啟動脂肪動員，又保證乳腺的結(jié)

5、構(gòu)脂不被降解，維持乳腺結(jié)構(gòu)的完整性；退化期，腺體內(nèi)脂滴開始相互融合成大的空泡狀脂肪細(xì)胞，重新呈現(xiàn)性成熟未妊娠狀態(tài)，此時ACACA和HSL表達(dá)水平均較低；(3)青春期、妊娠初期和退化期乳腺中的蛋白質(zhì)以糖蛋白和蛋白聚糖等結(jié)合蛋白為主；妊娠中晚期和泌乳期以乳蛋白為主。(4)奶山羊乳腺發(fā)育過程中，β-酪蛋白出現(xiàn)在妊娠中期，表達(dá)水平逐漸升高，至泌乳期達(dá)到最高，退化期逐漸下降，妊娠晚期β-酪蛋白大量蓄積在腺泡上皮細(xì)胞內(nèi)而不分泌到腺泡腔中，可能與其微