山羊皮膚發(fā)育形態(tài)學(xué)和免疫組織化學(xué)研究.pdf

1、為了解山羊皮膚組織發(fā)生發(fā)育規(guī)律及β1整合素、表皮生長(zhǎng)因子及受體在發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)及其功能意義，以探討皮膚組織發(fā)生過(guò)程中表皮干細(xì)胞和細(xì)胞因子的分布規(guī)律。本研究以6～18周齡的山羊胎兒皮膚為試驗(yàn)材料，采用組織學(xué)常規(guī)石蠟制片技術(shù)，蘇木精．伊紅染色和Masson三色染色方法詳細(xì)研究了山羊皮膚組織發(fā)生發(fā)育過(guò)程中的形態(tài)結(jié)構(gòu)和變化規(guī)律，并結(jié)合透射電鏡觀(guān)察了不同發(fā)育時(shí)期的山羊胎兒皮膚的超微結(jié)構(gòu)變化特點(diǎn)；在了解皮膚組織發(fā)生發(fā)育特點(diǎn)和規(guī)律的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步運(yùn)

2、用免疫組織化學(xué)SP法對(duì)山羊皮膚發(fā)育過(guò)程中β1整合素、表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor,EGF)及其受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)的分布及變化規(guī)律進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。結(jié)果如下： 1.6～7周齡的山羊胎兒皮膚表面平整，出現(xiàn)一層單層扁平上皮的表皮結(jié)構(gòu)；8周齡時(shí)變?yōu)閱螌又鶢钌掀ぃ?周齡時(shí)表皮增生為表層與生發(fā)層兩層，表皮與間充質(zhì)之間以基膜相連；10周齡時(shí)表皮分為

3、表層、中間層和生發(fā)層三層，真皮層開(kāi)始出現(xiàn)，與表皮分界明顯，其中含有少量膠原纖維和彈性纖維，在局部還可見(jiàn)到基底層細(xì)胞圍成的團(tuán)狀實(shí)心細(xì)胞群向間充質(zhì)內(nèi)突出形成的毛芽；11周齡，表皮繼續(xù)增厚，深層細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)少量張力原纖維，并發(fā)現(xiàn)朗格罕斯細(xì)胞，表皮內(nèi)還可見(jiàn)到原始毛囊及其附近形成的實(shí)心細(xì)胞索即汗腺；12～13周齡，表皮細(xì)胞出現(xiàn)角化層、透明層及顆粒層的分化，可見(jiàn)明顯的汗腺，真皮乳頭層形成，真皮內(nèi)膠原纖維的合成明顯增多；14～15周齡，表皮深層細(xì)胞內(nèi)張

4、力原纖維增多、變粗，并發(fā)現(xiàn)典型的橋粒結(jié)構(gòu)，毛球上皮細(xì)胞索開(kāi)始分化為外根鞘、內(nèi)根鞘的原基和毛發(fā)的前體，在毛囊的兩側(cè)可見(jiàn)皮脂腺和豎毛肌，真皮內(nèi)膠原纖維繼續(xù)增多，深部可見(jiàn)較多汗腺分泌部的斷面；16～17周齡，表皮層開(kāi)始變薄，毛開(kāi)始形成，并隨著發(fā)育逐漸長(zhǎng)出體表，真皮層內(nèi)膠原纖維和彈性纖維增多，真皮層厚度加大；18周齡以后，皮膚及其衍生物結(jié)構(gòu)繼續(xù)發(fā)育，漸趨完善。 2.在胎兒發(fā)育第6周就出現(xiàn)EGF與EGFR．的較弱表達(dá)，以后隨著胎齡的增加，

5、EGF與EGFR的表達(dá)呈不斷增高的趨勢(shì)。從分布部位來(lái)看，在胎兒發(fā)育的11周前，EGF陽(yáng)性反應(yīng)主要定位于表皮基底層細(xì)胞、毛囊上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等的胞漿內(nèi)，EGFR則主要位于相應(yīng)部位細(xì)胞的胞膜上；11～16周，隨著胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育EGF和EGFR的表達(dá)量增高，分布也更廣泛，從表皮的基底層、棘細(xì)胞層、真皮的毛囊細(xì)胞和成纖維細(xì)胞擴(kuò)展到血管的內(nèi)皮細(xì)胞、汗腺上皮細(xì)胞和豎毛肌，EGF主要定位于這些細(xì)胞的胞質(zhì)，EGFR則主要分布于這些細(xì)胞的膜上：17周

6、至出生，隨著表皮的明顯變薄，EGF主要分布于基底層細(xì)胞和毛囊上皮細(xì)胞，陽(yáng)性反應(yīng)繼續(xù)增強(qiáng)。 3.胎兒發(fā)育的第8周，表皮呈現(xiàn)較弱的β1整合素(β1-integrin)陽(yáng)性反應(yīng)；9～10周，β1-integrin陽(yáng)性產(chǎn)物主要出現(xiàn)于表皮深層細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)；11～13周，β1-integrin的分布范圍逐漸涉及到表皮的各層結(jié)構(gòu)；14～16周，隨著胚胎發(fā)育進(jìn)程，β1-interin的分布范圍擴(kuò)大至毛囊隆突區(qū)、外根鞘和汗腺上皮細(xì)胞，表皮細(xì)胞的